細(xì)胞外泌體提取步驟
日期：2023-10-17 14:54:46
提取細(xì)胞外泌體的步驟可以包括以下幾個關(guān)鍵的操作：
細(xì)胞培養(yǎng)和收集：選擇合適的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長到一定程度后，收集培養(yǎng)上清液并離心去除細(xì)胞碎片和殘留細(xì)胞。
預(yù)處理：對上清液進(jìn)行預(yù)處理以去除細(xì)胞殘余物和大顆粒物質(zhì)?？梢酝ㄟ^低速離心（如300×g）去除大細(xì)胞碎片，然后再用高速離心（如2,000×g或10,000×g）去除細(xì)胞碎片、凝集物和大顆粒。
超速離心：將預(yù)處理后的上清液進(jìn)行超速離心，以沉淀細(xì)胞外泌體。通常使用高速離心（如100,000×g或更高速度）離心沉淀細(xì)胞外泌體。
液體去除：去除上述步驟離心得到的沉淀，將剩余液體小心地抽取或排空，以避免干擾后續(xù)的操作。
再懸浮與清洗：使用合適的緩沖液再懸浮細(xì)胞外泌體沉淀，然后再次進(jìn)行離心。這個步驟可根據(jù)實驗需要重復(fù)進(jìn)行，目的是去除潛在的污染物和離心殘留。
冷凍保存或進(jìn)一步處理：根據(jù)實驗需求，可以將提取得到的細(xì)胞外泌體冷凍保存或進(jìn)一步進(jìn)行分離、純化、分析等后續(xù)處理。
細(xì)胞外泌體的提取步驟可能因研究目的、細(xì)胞類型、培養(yǎng)條件等因素而略有差異。
