Cell:更明亮的蛋白標記系統(tǒng)
日期:2015-01-28 08:56:30
成像細胞中的單個DNA或RNA分子,一般是在目標分子中插入多個拷貝的特定序列,讓熒光標記的蛋白能夠結(jié)合上來。這個序列的拷貝數(shù)越多,目標分子結(jié)合的熒光蛋白就越多,信號也就越明亮。“何不對蛋白做這種處理呢?”加州大學Ronald Vale實驗室的博士后Marvin Tanenbaum開始著手解決這個問題。
此前成像細胞內(nèi)蛋白的主要方式是,在其序列中填入一個發(fā)熒光的結(jié)構(gòu)域(比如綠色熒光蛋白GFP)。在一般熒光顯微鏡下,帶GFP結(jié)構(gòu)域的單個蛋白是很暗淡的,但添加太多GFP結(jié)構(gòu)域又會讓蛋白變得過大。
Tanenbaum為此開發(fā)了SunTag技術(shù)。他在目的蛋白中加入多個拷貝(多達24個)的多肽表位,然后將這個蛋白與能識別該表位的熒光抗體共表達。這一技術(shù)發(fā)表在近期的Cell雜志上。
“這個技術(shù)的美妙之處在于它比較簡單,”Albert Einstein醫(yī)學院的Robert Singer說。Tanenbaum和同事對這一系統(tǒng)進行了大量的優(yōu)化工作,這樣的努力是值得的。SunTag不僅可以讓蛋白更明亮,還可以將其他類型的蛋白吸引到多肽表位。