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Nature Methods介紹細(xì)胞生物學(xué)新研究工具

日期:2017-03-17 10:24:29

 來(lái)自阿爾伯塔大學(xué)的研究人員開(kāi)發(fā)出了一種使用光控制生物細(xì)胞水平的新方法。這種工具被稱為光可切割蛋白(photocleavable protein):PhoCl,也就是當(dāng)暴露于光線時(shí),蛋白會(huì)裂解開(kāi)來(lái),這樣科學(xué)家們就能以新的方式來(lái)研究和操縱細(xì)胞內(nèi)活性。

 

這一研究成果公布在3月的Nature Methods雜志上,領(lǐng)導(dǎo)這一研究的是阿爾伯塔大學(xué)的蛋白質(zhì)工程師Robert Campbell。他曾說(shuō)過(guò),“在我的職業(yè)生涯中期階段,我發(fā)現(xiàn)要想單純的進(jìn)行發(fā)明有些可怕。由假說(shuō)驅(qū)使的研究總是會(huì)得到一個(gè)答案,無(wú)論得到的是不是正確的答案。相比之下,由發(fā)明驅(qū)動(dòng)的研究往往有雙向出口,要不成功,要不失敗,而失敗很少有人提及。”

 

Campbell師承加州大學(xué)圣地亞哥分校的華裔諾獎(jiǎng)得主Roger Tsien(錢永?。K谧约旱穆殬I(yè)生涯中研發(fā)出了一種稱為FPX的新技術(shù)工具,這種工具能利用熒光蛋白在活細(xì)胞和組織里成像動(dòng)態(tài)的生化事件,將蛋白互作的變化轉(zhuǎn)變?yōu)榱⒓纯梢?jiàn)的顏色改變(紅-綠),這不僅為人們提供了即時(shí)檢測(cè)細(xì)胞變化的新工具,還向人們展示了構(gòu)建新一代生物感應(yīng)器的一種通用策略。

 

在這篇文章中,研究人員首先利用光可切割蛋白將細(xì)胞蛋白與抑制劑連接在一起,令其無(wú)法執(zhí)行正常的功能,這個(gè)過(guò)程被稱為鎖定。Campbell表示,“(然后)通過(guò)將光照射到細(xì)胞中,我們可以使光可切割蛋白裂解,從而去除抑制劑,令細(xì)胞內(nèi)蛋白解鎖”,一旦蛋白被解鎖,那么就可完成其在細(xì)胞內(nèi)的正常功能。

 

這一工具對(duì)于希望能調(diào)控細(xì)胞內(nèi)進(jìn)程的研究人員來(lái)說(shuō),相對(duì)容易使用,也應(yīng)用廣泛。

 

Campbell解釋說(shuō),光敏蛋白可以被用于研究任何活細(xì)胞的內(nèi)部工作。例如,光遺傳學(xué)工具廣泛應(yīng)用于激活小鼠的腦活動(dòng)。“我們可以利用光可切割蛋白在實(shí)驗(yàn)室研究單個(gè)細(xì)菌,酵母,人類細(xì)胞,甚至整個(gè)動(dòng)物,如斑馬魚或小鼠。不過(guò)首先需要將這些蛋白放入動(dòng)物體內(nèi),因此我們簡(jiǎn)單地將這種蛋白的基因剪接成DNA,利用已有技術(shù)將其插入到細(xì)胞中。”

 

目前Addgene可以提供光可切割蛋白基因。

 

“我們希望提供新的方法來(lái)了解細(xì)胞生物學(xué),”Campbell說(shuō),“未來(lái)這將能有更多潛在的應(yīng)用,比如研究哪些細(xì)胞會(huì)成為發(fā)育生物學(xué)中的哪些組織,以及分析基因編輯技術(shù)的可行性。”

 

光遺傳學(xué)是近年來(lái)最具創(chuàng)新性的顯微技術(shù)之一,通過(guò)結(jié)合遺傳學(xué)和光學(xué)方法,科學(xué)家們可以利用光來(lái)特異性控制活細(xì)胞中精確時(shí)間段的蛋白活性,以及蛋白相互作用。