封閉是為了使我們的抗體僅僅只能跟特異的蛋白質(zhì)結(jié)合而不是和膜結(jié)合。

常用的封閉液有bovine serum albumin(BSA)，non-fat milk，casein，gelatin，tween-20等，我們一般用non-fat milk。

在轉(zhuǎn)移結(jié)束前配好5%的Milk(TBST溶解)。轉(zhuǎn)移結(jié)束后將膜放入milk中block(一定要放在干凈的容器里，避免污染而且要足以覆蓋膜)，并清洗整理好用過(guò)的濾紙，以便下次使用。 Block 4°C O/N，或 RT 1小時(shí)。

封閉后可以不洗膜，讓膜的一角在吸水紙上接觸，把封閉液控一下即可。