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2011值得關(guān)注的技術(shù):糖蛋白組學(xué)

日期:2012-01-06 08:45:28

Nature Methods》盤點2011年度技術(shù),選出了最受關(guān)注的技術(shù)成果:人工核酸酶介導(dǎo)的基因組編輯(genome editing with engineered nucleases)技術(shù)。

 

除了進(jìn)一步編輯以外,《Nature Methods》也整理出了2011年最值得關(guān)注的幾項技術(shù),分別為:單細(xì)胞技術(shù)(Single-cell methods)、功能基因組資源(Functional genomic resources)、糖蛋白組學(xué)(Glycoproteomics)、單倍體因果突變(Causal mutations in a haploid landscape)、單層光生物成像(Imaging life with thin sheets of light)、非模式生物(Nonmodel organisms)、光基礎(chǔ)電生理學(xué)(Light-based electrophysiology)和RNA結(jié)構(gòu)(RNA structures )。

 

蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)無疑已經(jīng)成為了功能基因組學(xué)研究的重點,目前已經(jīng)能夠快速準(zhǔn)確的提取并鑒定蛋白,甚至達(dá)到了高通量飛克分子量(fmol)數(shù)量級。但是一個成熟蛋白質(zhì)的生物學(xué)活性需翻譯后修飾,這些修飾對于了解蛋白功能具有十分重要的意義,其中糖基化修飾是最重要的修飾方式之一,因此糖蛋白組學(xué)Glycoproteomics)應(yīng)運而生。

 

由于糖基化在多種生物學(xué)過程中起重要作用,比如細(xì)胞調(diào)控,免疫應(yīng)答等,而且更加重要的是這種修飾方式還參與了正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,因此科學(xué)家們對于糖蛋白組學(xué)十分感興趣,但是目前這一領(lǐng)域的技術(shù)方法卻嚴(yán)重缺乏,尤其是在幾個方法學(xué)技術(shù)方面。

 

首先作為一個翻譯后修飾過程,糖基化從定義上來說是屬于非模板性的,與其它簡單的翻譯后修飾,比如磷酸化不同,多聚糖結(jié)構(gòu)存在極大的差異,導(dǎo)致其分析尤為困難。一個簡單的蛋白可以有上十種,上百種不同的多聚糖修飾基團,而且蛋白糖基化修飾在細(xì)胞中豐度低,自我修飾化學(xué)計量數(shù)也低。

 

其次目前糖蛋白組學(xué)研究領(lǐng)域,以及蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域常常分屬于不同的領(lǐng)域,糖蛋白組學(xué)研究人員分析多聚糖結(jié)構(gòu),但忽略了其來源蛋白主體本身,而蛋白質(zhì)組學(xué)研究人員分析蛋白,卻忽略了其上附著的多聚糖。不過現(xiàn)在科學(xué)家們也越來越認(rèn)識到了整體研究的重要性,蛋白質(zhì)組學(xué)研究人員近期還報道了利用高通量方法,檢測蛋白糖基化位點的新成果——雖然這還不是多聚糖結(jié)構(gòu)的相關(guān)成果。糖蛋白組學(xué)研究組也開始集中分析單個蛋白上出現(xiàn)的所有多聚糖結(jié)構(gòu)——雖然這還并不是高通量分析。

 

質(zhì)譜技術(shù)已經(jīng)成為了蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的一種成熟技術(shù),也同樣在糖蛋白組學(xué)中扮演重要角色,蛋白鏈和多聚糖鏈之間存在顯著的化學(xué)特性差異,這帶來了測序挑戰(zhàn),但高分辨率質(zhì)譜分析儀器,以及一些更先進(jìn)的片段分析方法能幫助我們,除此之外,質(zhì)譜分析之前的糖蛋白分離和純化,以及之后的生物信息學(xué)分析也是重要的技術(shù)之一。

 

商業(yè)性的相關(guān)產(chǎn)品儀器不少,比如賽默飛世爾的Thermo Scientific LTQ Orbitrap組合式質(zhì)譜儀在蛋白質(zhì)組學(xué),即蛋白質(zhì)及其在生物體系中的結(jié)構(gòu)和功能的大規(guī)模研究方面發(fā)揮了重要作用,可以說是識別完整蛋白和酶消化蛋白、找到發(fā)生化學(xué)修飾的蛋白及識別修飾的類型和位點的重要儀器之一。

 

2011年糖蛋白組學(xué)研究也獲得了不少成果,比如研究人員確定了一種能夠產(chǎn)生糖蛋白的酶的結(jié)構(gòu),化學(xué)修飾中最頻繁的與天冬酰胺相連的糖基化,是由低聚糖轉(zhuǎn)移酶(OST)催化的,這種酶是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的一種膜蛋白復(fù)合物,研究人員完成了這種酶與一個受體肽形成復(fù)合物的細(xì)菌OSTX射線結(jié)構(gòu)測定,為了解酰胺態(tài)氮激發(fā)和糖基化提供了分子基礎(chǔ),也為糖蛋白和復(fù)合糖治療藥物的生成提供了新思路。

特別關(guān)注