一些罕見(jiàn)的腫瘤細(xì)胞攜帶著賦予耐藥性的突變，用標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)試程序通常無(wú)法檢測(cè)到。根據(jù)Nature雜志的兩項(xiàng)最新研究，這些突變可以通過(guò)患者的血液進(jìn)行檢測(cè)。

一些腫瘤攜帶著可賦予對(duì)某些特異藥物抗性的突變，對(duì)于具有這些突變的患者應(yīng)排除使用這些藥物。然而有時(shí)候一種腫瘤似乎并不符合這些條件耐藥也會(huì)出現(xiàn)。在最新一期（6月28日）的Nature雜志上，分別來(lái)自意大利和美國(guó)的研究人員領(lǐng)導(dǎo)的兩個(gè)研究小組報(bào)告稱一種結(jié)直腸癌的常見(jiàn)獲得性耐藥可通過(guò)攜帶特異基因KRAS突變的罕見(jiàn)腫瘤細(xì)胞以及藥物治療過(guò)程中不敏感細(xì)胞的過(guò)度生長(zhǎng)進(jìn)行解釋。令人感到興奮的是，兩個(gè)研究小組均證實(shí)他們可以在隨患者血流自由循環(huán)的腫瘤DNA中檢測(cè)到這一突變。他們的研究發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了利用血液樣本診斷和監(jiān)測(cè)癌癥的潛力，從而減少對(duì)于侵襲性程序如腫瘤活檢的需要。

結(jié)直腸癌患者往往接受靶向表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）藥物治療。EGFR是一種可以激活細(xì)胞增殖的信號(hào)蛋白。個(gè)體對(duì)于抗EGFR治療敏感性的一個(gè)關(guān)鍵預(yù)測(cè)因素就是看癌細(xì)胞中是否包含一種KRAS突變形式；KRAS蛋白在EGFR下游發(fā)揮功能，因此具有過(guò)度活性KRAS的細(xì)胞將不會(huì)對(duì)抗EGFR治療產(chǎn)生反應(yīng)。利用KRAS突變預(yù)測(cè)抗EGFR治療的效應(yīng)是一個(gè)成功的范例，也演示了對(duì)于癌癥生物學(xué)的理解應(yīng)該如何在藥物開(kāi)發(fā)早期對(duì)其做出告知。

然而，大多數(shù)被選定接受抗EGFR治療的患者在5-11月內(nèi)會(huì)對(duì)藥物產(chǎn)生二次耐受。結(jié)直腸癌研究的主要挑戰(zhàn)之一就是揭示與這種獲得性耐受相關(guān)的分子機(jī)制。一個(gè)重要的問(wèn)題是耐受機(jī)制是來(lái)自新的突變事件還是來(lái)自治療開(kāi)始就存在于腫瘤中的現(xiàn)有的克?。ê币?jiàn)和未被發(fā)現(xiàn)的突變攜帶細(xì)胞）。

Misale研究小組和Diaz研究小組利用體外實(shí)驗(yàn)和數(shù)學(xué)模型獲得的研究結(jié)果表明對(duì)于抗EGFR治療的二次耐受是一個(gè)既成事實(shí)，因?yàn)樽畛蹩雌鹬槐磉_(dá)野生型KRAS的腫瘤中本就存在KRAS突變克隆。兩篇文章還提供了一些結(jié)直腸癌患者的數(shù)據(jù)，這些患者的腫瘤通過(guò)活檢分類，確定治療初始存在KRAS野生型，然而作者們卻在他們接受兩種抗EGFR藥物西妥昔單抗（cetuximab）或帕尼單抗（panitumumab）治療后檢測(cè)到了KRAS突變克隆。利用“血液活檢”從患者血清中提取循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）使得這些臨床研究成為可能。隨后研究人員利用一種稱為BEAMing分析的超靈敏突變檢測(cè)方法對(duì)于ctDNA進(jìn)行了檢測(cè)。在兩項(xiàng)研究中，均在利用標(biāo)準(zhǔn)腫瘤成像技術(shù)檢測(cè)到耐藥之前確定了突變克隆。這些結(jié)果表明相同的生物機(jī)制（在這種情況下是KRAS突變）均可以驅(qū)動(dòng)初次和二次藥物耐受，當(dāng)腫瘤具有遺傳異質(zhì)性，使得一些細(xì)胞在治療過(guò)程中的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)時(shí)二次耐藥可能出現(xiàn)。

當(dāng)前準(zhǔn)確評(píng)估腫瘤異質(zhì)性的主要挑戰(zhàn)包括獲得入侵組織和適當(dāng)取樣的問(wèn)題。目前，生物標(biāo)記驅(qū)動(dòng)的治療決策主要依賴于檢測(cè)自最初診斷一直保存的原發(fā)腫瘤的活檢樣本和來(lái)自新轉(zhuǎn)移位點(diǎn)的活檢。然而單一的活檢是不充分的。原發(fā)腫瘤和它們的轉(zhuǎn)移灶是通過(guò)包含癌細(xì)胞、基質(zhì)和血管等支持結(jié)構(gòu)在內(nèi)的不同組織的混合物連接。此外，在腎細(xì)胞癌中的研究報(bào)道，致癌基因的常見(jiàn)變異有可能在腫瘤的不同區(qū)域存在差異。因此，單一的癌癥位點(diǎn)和一次腫瘤活檢有可能無(wú)法提供腫瘤景象的代表性圖譜。

如從前所提議的，這些采樣問(wèn)題應(yīng)該通過(guò)利用血液活檢研究ctDNA的基因組變異來(lái)消除。這種方法的優(yōu)點(diǎn)包括低侵襲性，方便在不同時(shí)間點(diǎn)獲取樣本，沒(méi)有空間抽樣偏差。然而研究人員還需要更好的理解在異質(zhì)性腫瘤中每種動(dòng)態(tài)細(xì)胞群對(duì)于ctDNA的影響。此外，分析還要求能夠查詢同一時(shí)間幾種基因中的突變，這是一個(gè)技術(shù)挑戰(zhàn)因?yàn)楫?dāng)前ctDNA總量和質(zhì)量還均較低。

在最近一次的嘗試中，研究人員利用新一代DNA測(cè)序技術(shù)同時(shí)篩查了來(lái)自卵巢癌患者的ctDNA以尋找?guī)追N癌癥相關(guān)基因的突變。這樣新興的突變檢測(cè)平臺(tái)提供了檢測(cè)異質(zhì)癌細(xì)胞群的標(biāo)準(zhǔn)。這一技術(shù)的應(yīng)用有可能從如Misale 等和 Diaz等證實(shí)的對(duì)導(dǎo)致藥物耐受的二次突變的早期診斷擴(kuò)展至包括轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)、手術(shù)后復(fù)發(fā)的診斷，以及早期檢測(cè)個(gè)體形成癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。