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Your Good Partner in Biology Research

倫敦奧運(yùn)會(huì)話題:反興奮劑研究

日期:2012-07-30 08:26:48

今年的夏季奧運(yùn)會(huì)對(duì)于那些濫用藥物的運(yùn)動(dòng)員而言將會(huì)是最為艱難的一屆比賽。以傳統(tǒng)測(cè)試為例,來自摩洛哥的長跑運(yùn)動(dòng)員Mariem Alaoui Selsouli1500米跑金牌有力的沖擊者,因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)樣本中有禁用的利尿劑呋塞米(furosemide)而被禁止參與倫敦奧運(yùn)會(huì)。今年,科學(xué)家們還納入了更多強(qiáng)有力的技術(shù)以逮住那些開始調(diào)整策略避免興奮劑檢測(cè)檢出的運(yùn)動(dòng)員。

 

英國HFL Sport Science藥物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室藥物與興奮劑檢測(cè)首席科學(xué)家Phil Teale解釋說:“新的測(cè)試采用大量不同的策略將網(wǎng)撒的更寬。而不再是采用那些只能檢測(cè)一種預(yù)定義藥物組的集中性的方法?!?/SPAN>

 

Teale指出歷史上研究人員是采用質(zhì)譜法來鑒定合成代謝類固醇和其他違禁化合物,但這種技術(shù)要求預(yù)先知道藥物的結(jié)構(gòu)。這使得“專門設(shè)計(jì)的”的類固醇能夠逃避檢測(cè),例如四氫孕三烯酮(THG)具有與其他類固醇相同的效應(yīng),可提高速度或增加肌肉質(zhì)量,但結(jié)構(gòu)卻略有不同。然而此次倫敦奧運(yùn)會(huì)實(shí)驗(yàn)室與葛蘭素史克(GlaxoSmithKline)制藥公司以及倫敦大學(xué)國王學(xué)院藥物控制中心共同努力,獲得了幾臺(tái)能夠記錄所有樣本數(shù)據(jù)的質(zhì)譜儀,這將使得官員們能夠逆向篩查樣本尋找新發(fā)現(xiàn)的性能增強(qiáng)的物質(zhì)。

 

研究人員也在展開以細(xì)胞為基礎(chǔ)的檢測(cè)研究,這可以讓科學(xué)家們?cè)诩幢悴恢罊z測(cè)的是何種類固醇的情況下也能夠給出關(guān)于類固醇濫用的信息。一種方法是利用酵母報(bào)告系統(tǒng),當(dāng)有合成代謝類固醇激活雄激素受體時(shí),β-半乳糖苷酶會(huì)被開啟。在近期的一項(xiàng)研究中,研究人員證明包含THG等多種合成代謝類固醇的尿液樣本可以促使β-半乳糖苷酶表達(dá),而非合成代謝類固醇如雌激素則不會(huì)。另一項(xiàng)研究證明酵母報(bào)告系統(tǒng)能夠在攝入2周后檢測(cè)到單個(gè)類固醇的劑量,而標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜檢測(cè)只能在藥物攝入的頭6天檢測(cè)到。

 

對(duì)于其他的一些興奮劑,例如某些運(yùn)動(dòng)員相信注射人生長激素(hGH)可以提高肌肉性能,還難以直接進(jìn)行檢測(cè)。在2008年的北京奧運(yùn)會(huì)對(duì)于hGH的檢測(cè)主要是測(cè)量生長激素亞型的變化比值來確定是否注射了重組hGH(模擬了一種特殊的天然亞型)。倫敦大學(xué)國王學(xué)院的名譽(yù)教授Peter Sönksen說現(xiàn)在還只能在24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)重組hGH,這樣的檢測(cè)因此對(duì)于檢測(cè)長期hGH濫用是無效的,而hGH必須是用藥數(shù)月才能顯現(xiàn)效應(yīng)。不過數(shù)周前世界反違禁藥物組織(World Anti-Doping Agency,WADA)批準(zhǔn)了一種新生物標(biāo)記物檢測(cè),在倫敦奧運(yùn)會(huì)將初次登場。它可以檢測(cè)胰島素樣生長因子-1IGF-1)和膠原蛋白的突然增高。機(jī)體對(duì)hGH做出反應(yīng)會(huì)生成膠原蛋白,利用它可以揭示hGH濫用,并可以在注射2周后檢測(cè)到人工hGH。

 

另一種常見性能增強(qiáng)藥物是紅細(xì)胞生成素(EPO),能夠促進(jìn)紅細(xì)胞生成,使運(yùn)動(dòng)員提高血液攜氧能力。“如果你去到高海拔地區(qū),EPO增高,就可以調(diào)高其他基因,”James Rupert說。James Rupert在英屬哥倫比亞大學(xué)從事EPO研究。但如果只有EPO水平增高,而沒有伴隨一組高地誘導(dǎo)基因,則表明有可能是通過注射重組蛋白,人為給予的EPO。雖然這一研究還未產(chǎn)生一種反興奮劑測(cè)試,“原理上是可靠的,”Rupert說。Rupert希望能看到未來EPO檢測(cè)被納入到奧運(yùn)會(huì)反興奮劑檢測(cè)中。由瑞典科學(xué)家研究的另一種新的EPO檢測(cè)策略是依賴重組EPO與內(nèi)源性EPO的碳水化合物修飾的差異圖譜。如果取得成功,這種檢測(cè)相比當(dāng)前的方法將能檢測(cè)更少量的重組EPO。

 

科學(xué)家們也在尋找興奮劑的間接證據(jù)。一種流行的提高紅細(xì)胞的方法就是用運(yùn)動(dòng)員獎(jiǎng)過去移除并保存的血液拿來進(jìn)行自體輸血。自體血液興奮劑具有與EPO一樣的益處,“并且檢測(cè)不到,”蘇黎世大學(xué)心臟生理學(xué)家Carsten Lundby解釋說。它不會(huì)改變運(yùn)動(dòng)員的激素圖譜或DNA序列(像來自供體的血液就有可能)——這些改變可通過傳統(tǒng)測(cè)試進(jìn)行測(cè)定。但是,科學(xué)家們正在努力。例如一種新技術(shù)甚至并非檢測(cè)血液,而是檢測(cè)尿液。在儲(chǔ)存血液的塑料袋中有一種稱為鄰苯二甲酸鹽(phthalates)的化合物,可以滲入到樣本中,將血液輸回到運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)將把這種不尋常的化合物也引入到體內(nèi)。西班牙和匈牙利的研究人員正在設(shè)計(jì)一種技術(shù)檢測(cè)尿液中鄰苯二甲酸鹽的代謝產(chǎn)物,作為輸血的證據(jù)。

 

Rupert說另一個(gè)困難是確定是否測(cè)量如激素等潛在興奮劑,因?yàn)槠湓谶\(yùn)動(dòng)員血液中真正增高水平在個(gè)體間差異很大,且精英運(yùn)動(dòng)員可能開始就不會(huì)有這樣的“正?!彼?。相反,隨時(shí)間采集運(yùn)動(dòng)員的多個(gè)血液和尿液樣本變得越來越普遍,構(gòu)建出一個(gè)“生物學(xué)護(hù)照”使興奮劑官員獲得每個(gè)人的標(biāo)準(zhǔn)正常范圍。只有超出個(gè)體運(yùn)動(dòng)員的正常范圍的變化才會(huì)引起懷疑。

 

Teale 說:“研究人員正在研究各種方法學(xué)。有了當(dāng)前的測(cè)試和開發(fā)中的新策略,我們真的有機(jī)會(huì)審查并深度挖掘運(yùn)動(dòng)員的樣本?!?/SPAN>

 

除了設(shè)計(jì)更好地針對(duì)已知興奮劑策略的測(cè)試,科學(xué)家們也希望能夠預(yù)測(cè)肆無忌憚的教練和運(yùn)動(dòng)員有可能接下來嘗試的策略。未來可能的一種興奮劑方法是基因治療,將增強(qiáng)性能的基因通過病毒載體導(dǎo)入到運(yùn)動(dòng)員的基因組中。盡管這樣的遺傳興奮劑例子還沒有得到證實(shí),一些研究人員相信這只是時(shí)間的問題。Sönksen指出1988年漢城奧運(yùn)會(huì)早期采用hGH作為興奮劑(遠(yuǎn)早于科學(xué)家們真正了解它)就是一個(gè)警示故事。

 

基因治療或許不會(huì)太遙遠(yuǎn)。例如Repoxygen是一種傳遞EPO基因的病毒載體,已經(jīng)對(duì)貧血患者開展了有限次的測(cè)試。這對(duì)想要提高自身EPO水平增強(qiáng)性能的運(yùn)動(dòng)員是一個(gè)明顯的興趣。研究人員擔(dān)心一旦基因整合到基因組中,將生成無法與正常形式相區(qū)別的EPO。但科學(xué)家們也提出一些可能性,整合EPO基因可能會(huì)包含病毒載體基因組的殘余物,表明這樣的外源DNA可用作EPO基因治療的標(biāo)記物。此外,人為引入基因通常會(huì)被除去內(nèi)含子,留下一個(gè)可檢測(cè)的DNA標(biāo)記,Rupert說。