創(chuàng)新參選:組織RNA提取技術(shù)改進(jìn)
日期:2012-09-06 08:22:41
“賽默飛之生物通2012實驗室創(chuàng)新技術(shù)大獎”評選活動開展以來,生物通已經(jīng)陸陸續(xù)續(xù)收到不少項目,這些項目中有的能減少實驗步驟,有的能降低實驗成本,還有一些改進(jìn)了實驗設(shè)備,讓我們的實驗過程更加輕松。
參選項目:組織RNA提取
背景:在RNA提取過程中,通常會選用液氮,但是用液氮提取稍大塊組織時,遇到液氮變得很硬,組織在研缽中容易受到研磨棒的壓力而濺出研缽使得組織丟失,另外一種情況是提取很小和很少量的組織時(比如提取一根觸角的RNA),由于研缽體積較大,會粘很多在研缽表面,使得珍貴的樣品減少。
方法改進(jìn):采用1.5ml離心管+塑料筷子方法試驗準(zhǔn)備:在市場上購買塑料筷子(我們曾經(jīng)是在食堂拿了幾根,不推薦),從小頭部分截取1/3丟掉,剩下的2/3比著1.5ml離心管磨成能匹配離心管的底部即可,(路邊找塊石頭或磚頭即可完成),磨好后可以和槍頭這些一塊滅菌處理,提取很少樣品RNA時,將樣品放入1.5ml無RNase離心管,離心管放到藍(lán)色托板上(我們實驗室叫48孔藍(lán)板),加入少許液氮(這里可以用一次性紙杯,將口捏一個小角,從小角處倒出,記住放入杯托,不然很涼哦),旋轉(zhuǎn)研磨,液氮快干時再加入一次液氮,重復(fù)研磨,再加入trizol,后面步驟就一樣了;對于大塊樣品,先放入離心管,加入液氮,迅速用磨好的筷子左右旋研磨,一會就成細(xì)粉末了,不行就再加一次液氮,呵呵,將粉末迅速倒入研缽中,加入液氮繼續(xù)研磨,因為組織較大,離心管里就不適合加trizol了,所以放到研缽中,再按照以前的方法做就好了!