來自賓夕法尼亞大學(xué)的研究人員，成功對12名HIV陽性患者的免疫細(xì)胞進(jìn)行遺傳工程改造使之能抵御感染，并降低了一些完全脫離抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療(ADT)患者的病毒載量——其中一名患者已無法檢測到HIV病毒水平。這項(xiàng)研究是首次報道在人類中使用基因編輯方法，研究結(jié)果發(fā)表在《英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》（NEJM）上。

這項(xiàng)I期研究由來自賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院、阿爾伯特愛因斯坦醫(yī)學(xué)院的研究人員和加州“Sangamo BioSciences”生物醫(yī)學(xué)公司的科學(xué)家們合作完成。Sangamo BioSciences開發(fā)了臨床實(shí)驗(yàn)中所采用的鋅指核酸酶（ZFN）技術(shù)和T細(xì)胞療法。

賓夕法尼亞大學(xué)Perelman醫(yī)學(xué)院病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)系免疫療法教授Carl H. June博士說：“這項(xiàng)研究表明了，我們可以安全有效地改造HIV患者自身的T細(xì)胞，模擬自然發(fā)生的抵抗病毒過程，輸入這些遺傳工程細(xì)胞，使之持續(xù)存在于體內(nèi)，無需使用藥物即有可能抑制病毒載量。這增強(qiáng)了我們的信念：改造T細(xì)胞是消除終身接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療需要，并有可能促成HIV/AIDS功能性治愈方法的關(guān)鍵。”

June和他的同事們利用ZFN技術(shù)對患者的T細(xì)胞進(jìn)行了改造模擬CCR5-delta-32突變。由于這種罕見突變能夠提供對HIV病毒的天然抵抗引起科學(xué)界的極大興趣，但其只存在于1%的普通群體中。通過誘導(dǎo)這些突變，科學(xué)家們減少了CCR5表面蛋白表達(dá)。沒有CCR5，HIV無法進(jìn)入，使得患者細(xì)胞能夠抵御感染。

在這項(xiàng)研究中，研究小組將稱作為SB-728-T的改造細(xì)胞輸入到兩組患者體內(nèi)，所有患者在2009年5月-2012年6月間單次輸入了大約100億個細(xì)胞。6人從輸入后的4周開始，在長達(dá)12周的時間里完全脫離抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療，另外6名患者仍然接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療。

作者們報告稱這種輸注是安全且可以耐受的，且在追蹤隨訪期間測試表明改造T細(xì)胞持續(xù)存在于患者體內(nèi)。初次輸注1周后，測試表明患者體內(nèi)的改造T細(xì)胞迅速上升。盡管在數(shù)周的時間里血液中這些細(xì)胞逐漸回落，但在ADT治療中斷期間改造細(xì)胞下降程度遠(yuǎn)小于未經(jīng)改造的T細(xì)胞。研究人員還在腸相關(guān)淋巴組織中觀察到有改造細(xì)胞。腸相關(guān)淋巴組織是免疫細(xì)胞的主要儲存庫，也是HIV感染的重要儲存庫，這表明改造細(xì)胞在體內(nèi)正常發(fā)揮功能及運(yùn)輸。

研究還表明這種方法有望抑制HIV病毒。在4名治療中斷12周的患者體內(nèi)病毒載量(HIV-RNA)下降。其中一名患者的病毒載量降至低于檢測限度；有趣的是，隨后發(fā)現(xiàn)這名患者有CCR5 delta-32基因雜合突變。

Levine 說：“由于一半的受試者CCR5基因遭受天然破壞，這種基因編輯方法是以從單親處遺傳這一突變?yōu)榛A(chǔ)。這種情況使得我們更好地了解了這一突變，以及機(jī)體對于治療的反應(yīng)，開啟了另一扇研究之門。”

在過去的6年里以CCR5突變?yōu)榛A(chǔ)的療法勢頭強(qiáng)勁，尤其是在一名德國患者得到“功能性”治愈后。這名男子在診斷出患有急性髓性白血?。?/span>AML）之后，接受了來自一名CCR5雙等位基因突變供體的干細(xì)胞移植后，自2008年起脫離了ADT。由于異體移植有高死亡風(fēng)險，需要長期住院治療，對于沒有患血癌的HIV患者而言并非是一種實(shí)用的治療方案，研究人員正在嘗試復(fù)制這一現(xiàn)象。但近期兩名波士頓患者證實(shí)，除非供體CCR5雙等位基因突變否則無法有效地清除體內(nèi)的HIV，這兩人本以為能夠通過移植獲得“功能性”治愈，卻只看到病毒載量飆升。

盡管波士頓患者的結(jié)果讓研究界感到失望，但卻指出了對抗病毒的一些關(guān)鍵因素。

Penn艾滋病研究中心艾滋病臨床實(shí)驗(yàn)部門主任Pablo Tebas博士說：“這些病例強(qiáng)調(diào)了需要保護(hù)T細(xì)胞免受病毒感染。波士頓的病例告訴我們，柏林患者這種情況并非是化療或是輸入供體干細(xì)胞擊退了HIV；而是來自缺乏CCR5的T細(xì)胞的保護(hù)。這些程序不可能完全消除HIV病毒儲存庫，當(dāng)病毒恢復(fù)之時T細(xì)胞易受到感染。ZFN技術(shù)保護(hù)了T細(xì)胞免受HIV感染，或許能夠近乎完全地消除病毒，因?yàn)檫@些細(xì)胞仍然具有功能。”

進(jìn)一步臨床實(shí)驗(yàn)將在更大群的患者中評估更多的改造T細(xì)胞，以及在體內(nèi)提高更多細(xì)胞持續(xù)存留時間以獲得治療效應(yīng)的策略。