體液免疫功能的檢測
日期:2010-07-30 14:55:56
一、補體測定
1、血清總補體活性測定
當(dāng)兔抗羊紅細(xì)胞血清與羊紅細(xì)胞結(jié)合后,遇到補體即可使羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血,依據(jù)這一特點可建立測定血清中總補體活性的方法。
當(dāng)血清的效價和綿羊紅細(xì)胞濃度保持一定的情況下,在規(guī)定的反應(yīng)溫度和時間內(nèi),溶血程度與補體量呈正相關(guān)。因此,通過測定溶血程度,即可測知補體的含量。目前常用的方法是用 50%補體溶血試驗(CH30)測定總補體活性,即求出使50%致敏羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血時的血清最小用量。以CH50單位/ml表示。
2、補體旁路途徑活性測定
用于人和動物血清補體旁路途徑活性的測定,其依據(jù)是未致敏的家兔紅細(xì)胞可以激活B因子,引起補體旁路途徑活化,導(dǎo)致兔紅細(xì)胞溶解。此法是將一定濃度和容積的新鮮家兔紅細(xì)胞懸液與不同量的待檢血清混合,作用一定時間后觀察溶血反應(yīng)。根據(jù)引起50%溶血所需的最小補體量,計算出待檢血清補體旁路途徑的活性,以ACH50單位/ml表示。
3、補體組分測定
目前已能對所有的補體組分進(jìn)行提純、鑒定和制備相應(yīng)的特異性抗體,并對多種補體組分及其裂解產(chǎn)物進(jìn)行定量測定。常用的方法是單向免疫擴散(SRID)或火箭電泳法?,F(xiàn)已建立更為靈敏、快速的免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)及放射免疫測定(RIA)等方法。
二、免疫球蛋白測定
1、用已知抗原檢測相應(yīng)抗體,如各種感染性疾病的輔助診斷和流行病學(xué)調(diào)查等。
2、通過免疫動物或單克隆抗體技術(shù)制備特異抗體,對Ig進(jìn)行定性或定量測定,以及用于與Ig異常的有關(guān)疾病的診斷,如免疫缺陷或免疫增生病。
三、免疫復(fù)合物檢測
1、組織內(nèi)的IC檢查
對于組織中沉積的IC的檢查,常用的方法是將待檢組織切片以熒光素、酶或全溶膠標(biāo)記的抗體進(jìn)行免疫組化染色后鏡檢。通常是用標(biāo)記的抗球蛋白抗體或抗C3抗體檢查IC中的Ig或補體成分。
2、體液中循環(huán)IC檢查
(1)抗原特異性方法 通過區(qū)別游離的抗原和與抗體結(jié)合的抗原,選擇性測定含有某種特定抗原的IC;在疑為由某種抗原引起免疫病理反應(yīng)的特定疾病時,可用此類方法分析IC中的抗原成分。較為常用的方法是先用PEG沉淀檢品中IC,再與吸附特異性抗體的富含A蛋白的葡萄球菌(SAC)作協(xié)同凝集試驗進(jìn)行抗原檢測?;蛴锰禺愋钥贵w包被固相載體,吸附檢品中IC分子上的抗原,用ELISA法進(jìn)行測定,但應(yīng)同時設(shè)已知陽性對照。
(2)抗原非特異性方法 此法不考慮形成IC的抗原物質(zhì),并且檢測方法多種,如:物理方法,分子受體法,細(xì)胞受體法。
四、細(xì)胞因子檢測
常用的細(xì)胞因子檢測方法有兩類,即生物學(xué)活性檢測法、免疫學(xué)檢測法。
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