快速制備單克隆抗體的方法
日期：2023-05-17 14:53:38
單克隆抗體mAb（Monoclonal Antibody）是針對特定抗原的單一克隆抗體，其制備需要經(jīng)過多個步驟。隨著技術(shù)的發(fā)展，單克隆抗體制備方法也越來越多樣化和高效化。以下是幾種可供選擇的快速制備單克隆抗體的方法：
免疫細(xì)胞篩選法Immune Cell Screening
免疫細(xì)胞篩選法是利用抗原處理免疫細(xì)胞后，在高通量顯微鏡下觀察細(xì)胞的反應(yīng)和特征，篩選出目標(biāo)細(xì)胞并進(jìn)行單細(xì)胞分離，最終獲得單克隆抗體。該方法操作簡便、高通量、快速，且適用于大規(guī)模篩選。
單細(xì)胞擴(kuò)增法Single Cell Amplification
單細(xì)胞擴(kuò)增法需要將免疫細(xì)胞通過多次限制性稀釋和培養(yǎng)，使每個細(xì)胞獨(dú)立生長形成單個克隆細(xì)胞，然后從單個細(xì)胞中收獲單克隆抗體。該方法需要較長時(shí)間，并且可能存在細(xì)胞生長性差異導(dǎo)致的偏差。但該方法能獲得高質(zhì)量的單克隆抗體且適用范圍更廣。
基因組DNA篩選法Genomic DNA Screening
基因組DNA篩選法是先通過PCR擴(kuò)增出免疫細(xì)胞基因組中的重鏈和輕鏈基因，然后進(jìn)行克隆限制性酶切和測序分析，最終篩選出合適的克隆。該方法易于操作、成本低且適用于多種物種。但獲得的克隆數(shù)量較少且存在突變等不確定因素。
親和層析法Affinity Chromatography
親和層析法依靠目標(biāo)抗原與抗體的親和力，將懸浮液中的抗體通過某種化學(xué)或物理方式吸附到親和樹脂上，再經(jīng)洗脫、純化和檢測等步驟，最終獲得單克隆抗體。該方法適用于大規(guī)模生產(chǎn)且可以同時(shí)獲得多種克隆抗體，但需要特定的親和樹脂和條件，并且可能會因親和力不足而導(dǎo)致重要抗原無法被識別的問題。
以上四種方法都有各自的優(yōu)勢和局限性，具體應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和條件選擇合適的方法進(jìn)行單克隆抗體的制備。
