雙特異性抗體的制備方法

日期：2023-05-31 13:28:35

雙特異性抗體（bispecific antibodies, BsAbs）是近年來快速發(fā)展的一種新型生物藥物，具有兩個(gè)不同的抗原結(jié)合位點(diǎn)，能夠同時(shí)與兩種特異性抗原結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)多種治療方式的應(yīng)用。該類抗體的制備方法多種多樣，常見的制備方法包括雜交免疫球蛋白（heterodimeric Fabs）、雙鏈變量區(qū)抗體（variable domains of heavy and light chains，VHH-VL）和微型抗體（diabodies）等。

一、雜交免疫球蛋白制備方法

雜交免疫球蛋白（heterodimeric Fabs）可由兩個(gè)單一特異性抗體的 Fab 片段組成。該方法的制備流程如下：

1、分別構(gòu)建兩個(gè)不同的單一特異性抗體。
2、將兩個(gè)抗體的 Fab 片段分別剪切下來。
3、通過交聯(lián)反應(yīng)，將兩個(gè) Fab 片段結(jié)合起來形成雜交免疫球蛋白。

二、雙鏈變量區(qū)抗體制備方法

雙鏈變量區(qū)抗體（VHH-VL）是基于自然的駱駝、鯨魚等動(dòng)物體內(nèi)生成的單域抗體進(jìn)行改造得到的，其特點(diǎn)是只包含一個(gè)完整的抗原結(jié)合位點(diǎn)，但具有高度的親和力和穩(wěn)定性。該方法的制備流程如下：

1、通過免疫技術(shù)或基因工程技術(shù)制備單域抗體（VHH）。
2、使用鏈重組技術(shù)，將兩個(gè) VHH 片段結(jié)合起來，形成雙鏈變量區(qū)抗體。

特異性抗體

三、微型抗體制備方法

微型抗體（diabodies）是由兩個(gè)不同特異性抗體的重鏈變量區(qū)和輕鏈變量區(qū)相互連接而成的分子，它可以以二聚體的形式，同時(shí)與兩種抗原結(jié)合。該方法的制備流程如下：

1、利用基因工程技術(shù)從兩個(gè)單一特異性抗體中分離出重鏈和輕鏈變量區(qū)。
2、將兩個(gè)變量區(qū)連接起來，形成蛋白質(zhì)分子。
3、通過經(jīng)驗(yàn)確定合適的二聚體構(gòu)型，并進(jìn)行優(yōu)化。

以上是雙特異性抗體的主要制備方法，各種制備方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，選擇恰當(dāng)?shù)闹苽浞椒ㄐ枰鶕?jù)具體應(yīng)用情況和目標(biāo)去選擇。