標(biāo)簽抗體與內(nèi)參抗體的區(qū)別是什么？

日期：2023-06-01 15:08:36

標(biāo)簽抗體和內(nèi)參抗體都是用于免疫印跡（Western blotting）等蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)中的關(guān)鍵元素。

首先，我們需要了解一下 Western blotting 技術(shù)的基本原理。Western blotting 技術(shù)是利用特異性抗體結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì)，并將其從復(fù)雜的混合蛋白質(zhì)體系中分離出來(lái)，然后通過(guò)抗體與蛋白質(zhì)結(jié)合反應(yīng)產(chǎn)生信號(hào)，再利用檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)、定量這些信號(hào)，來(lái)判斷待測(cè)樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)的存在和表達(dá)水平。

標(biāo)簽抗體

現(xiàn)在來(lái)說(shuō)說(shuō)標(biāo)簽抗體和內(nèi)參抗體的區(qū)別：

1、標(biāo)簽抗體

標(biāo)簽抗體通常是特異性識(shí)別某種特殊標(biāo)記的抗體，例如 FLAG 標(biāo)簽、HA 標(biāo)簽、Myc 標(biāo)簽等常見(jiàn)的標(biāo)簽。在 Western blotting 實(shí)驗(yàn)中，通常會(huì)利用這些標(biāo)簽進(jìn)行蛋白質(zhì)的表達(dá)和檢測(cè)。例如，當(dāng)我們?cè)诒磉_(dá)待檢測(cè)蛋白質(zhì)時(shí)，同時(shí)將其與 FLAG 標(biāo)簽融合，那么在 Western blotting 實(shí)驗(yàn)中，我們就可以用相應(yīng)的抗 FLAG 標(biāo)簽的抗體進(jìn)行檢測(cè)。

標(biāo)簽抗體在 Western blotting 實(shí)驗(yàn)中通常作為檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的主要抗體，用于檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)的存在與否。由于標(biāo)簽抗體可以專門識(shí)別標(biāo)記，具有極高的特異性和靈敏度，因此在實(shí)驗(yàn)中被廣泛使用。

內(nèi)參抗體

2、內(nèi)參抗體

內(nèi)參抗體是用于標(biāo)準(zhǔn)化 Western blotting 實(shí)驗(yàn)中某些步驟的抗體。Western blotting 實(shí)驗(yàn)中，我們往往需要使用內(nèi)參蛋白來(lái)作為比較基準(zhǔn)。內(nèi)參蛋白必須滿足在各個(gè)樣品中表達(dá)水平相對(duì)穩(wěn)定，且表達(dá)量不受待測(cè)蛋白質(zhì)的影響。在進(jìn)行 Western blotting 實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們會(huì)將待檢測(cè)蛋白和內(nèi)參蛋白一起加載到同一個(gè)凝膠或膜片上，并通過(guò)檢測(cè)它們的比例來(lái)計(jì)算待測(cè)蛋白的表達(dá)量。

內(nèi)參抗體通常用于檢測(cè)內(nèi)參蛋白，而不是作為待檢測(cè)蛋白的主要抗體。例如，β-actin、GAPDH等常見(jiàn)內(nèi)參蛋白都有相應(yīng)的抗體可以使用，這些抗體具有良好的可控性和快速性，可以很好地輔助實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。

標(biāo)簽抗體和內(nèi)參抗體主要區(qū)別在于在 Western blotting 實(shí)驗(yàn)中的使用目的和方式。標(biāo)簽抗體通常作為檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的主要抗體，用于檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)的存在與否；而內(nèi)參抗體則用于標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)過(guò)程中某些步驟，作為比較基準(zhǔn)。