抗體分離純化的原理
日期:2023-07-04 16:11:06
抗體的分離純化原理主要依靠其特異性與抗原結(jié)合的親和作用。以下是常見的抗體分離純化方法及其原理:
親和層析法:利用抗體與特定抗原結(jié)合的親和作用,將目標(biāo)抗體選擇性地吸附在具有相應(yīng)配體的固定相上,然后通過洗脫將目標(biāo)抗體從固定相上解離下來。這種方法適用于多種規(guī)模和形式的樣品,可以選擇性地純化特定抗體。
蛋白A/G/L親和層析法:蛋白A、蛋白G和蛋白L是常用的抗體親和層析材料。它們能夠與抗體的Fc區(qū)域或輕鏈結(jié)合,在一定條件下選擇性地吸附目標(biāo)抗體,然后通過調(diào)整條件解離目標(biāo)抗體進(jìn)行純化。
離子交換層析法:利用離子交換固定相,根據(jù)抗體與固定相之間的電荷差異,通過調(diào)整洗脫條件(如鹽濃度、pH值)使得抗體與固定相發(fā)生相互作用和解離,實現(xiàn)抗體的分離純化。
凝膠過濾層析法:利用凝膠的孔隙大小來分離不同分子量的蛋白質(zhì),可以將目標(biāo)抗體從其他小分子雜質(zhì)中分離出來,并保留在凝膠上。
電泳法:通過電場作用,根據(jù)抗體的電荷和分子量的不同,使其在凝膠電泳過程中發(fā)生遷移,并進(jìn)行分離純化。
這些方法可以根據(jù)實際需要和樣品特性進(jìn)行選擇和組合使用,以達(dá)到對抗體的有效分離和純化。
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