雙特異性抗體制備流程
日期：2023-07-17 16:23:26
雙特異性抗體（Bispecific Antibodies）是一種能夠同時結(jié)合兩個不同抗原的抗體分子，用于治療疾病或進行研究。下面是一般的雙特異性抗體制備流程：
設(shè)計：確定目標抗原及其結(jié)構(gòu)和特性，并設(shè)計合適的雙特異性抗體結(jié)構(gòu)和連接方式。
基因工程：使用基因工程技術(shù)構(gòu)建含有兩個不同的抗體變量區(qū)（VH和VL）序列的基因組。這可以通過合成DNA片段、PCR擴增、引物設(shè)計等方法完成。
連接：將兩個抗體變量區(qū)的基因組連接在一起，形成單個的雙特異性抗體基因。
表達載體構(gòu)建：將雙特異性抗體基因插入適當?shù)谋磉_載體中，如質(zhì)?；虿《据d體。該載體通常包括啟動子、信號序列和選擇標記等功能元素。
細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染：將構(gòu)建好的表達載體導(dǎo)入適當?shù)募毎到y(tǒng)中，例如CHO細胞、HEK293細胞或其他真核細胞。通過細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染，使表達載體進入細胞并開始抗體的合成。
蛋白表達與純化：經(jīng)過培養(yǎng)和表達后，收集細胞培養(yǎng)上清液。使用親和層析、凝膠過濾等技術(shù)對雙特異性抗體進行純化和富集。
鑒定和驗證：對純化的雙特異性抗體進行質(zhì)量鑒定，如SDS-PAGE、Western blotting或ELISA等技術(shù)，以確定抗體的結(jié)構(gòu)和功能。
功能驗證：進行體外和/或體內(nèi)實驗，驗證雙特異性抗體的生物活性和效果。
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