鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)
日期:2023-07-25 16:37:18
鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)是一種通過鼠源性B細胞與雞IgY抗原進行免疫和融合的技術(shù)流程,用于獲得針對雞IgY的高特異性和高親和力的單克隆抗體。以下是一般的鼠抗雞IgY單克隆抗體制備技術(shù)步驟:
抗原制備:從雞的血清或蛋黃中提取IgY抗原,可以通過凝集素沉淀、離心等方法純化IgY。
免疫原選擇:選擇適當?shù)拿庖咦魟┖兔庖哂媱?,將雞IgY抗原注射到小鼠體內(nèi),激發(fā)小鼠產(chǎn)生免疫應答。
融合細胞制備:在免疫結(jié)束后,收集小鼠脾臟等淋巴組織,制備單細胞懸浮液。
隨機雜交:將小鼠B細胞與鼠髓瘤細胞(如SP2/0或NS-1)進行融合,形成雜交瘤細胞。
雜交瘤篩選:在培養(yǎng)基中篩選出產(chǎn)生針對雞IgY的單克隆抗體的雜交瘤細胞。
單克隆抗體擴增:將成功篩選出的單克隆細胞株進行擴增培養(yǎng)。
單克隆抗體純化:通過離心、過濾和親和層析等技術(shù),從培養(yǎng)上清中純化出單克隆抗體。
驗證和鑒定:對純化得到的單克隆抗體進行特異性和親和力的驗證和鑒定。
每個實驗室可能有不同的優(yōu)化步驟和具體操作細節(jié),請在實施前參考相關(guān)文獻或咨詢專業(yè)人士。
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