大鼠單克隆抗體的制備原理
日期：2023-09-13 13:36:00
大鼠單克隆抗體的制備主要包括以下步驟：
免疫：將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗原特異性抗體。
融合：從免疫小鼠體內(nèi)提取脾細(xì)胞和骨髓細(xì)胞，與鼠髓瘤細(xì)胞（如SP2/0或NS0細(xì)胞）進(jìn)行細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞（hybridoma）。
篩選：通過培養(yǎng)基中的選擇性物質(zhì)，篩選出雜交瘤細(xì)胞并進(jìn)行克隆化，得到單克隆細(xì)胞株。
培養(yǎng)和收獲：將單克隆細(xì)胞株培養(yǎng)在培養(yǎng)基中，使其不斷增殖。當(dāng)培養(yǎng)基內(nèi)的抗體達(dá)到一定濃度時(shí)，收獲培養(yǎng)上清液。
純化和鑒定：使用親和層析、離心、超濾等方法對(duì)培養(yǎng)上清液進(jìn)行純化，獲取純化的單克隆抗體。同時(shí)，可以通過免疫電泳、Western blot等技術(shù)進(jìn)行鑒定，確保所得抗體具有特定的抗原結(jié)合活性。
整個(gè)過程中，關(guān)鍵的一步是雜交瘤細(xì)胞的融合，它使得不穩(wěn)定的抗體產(chǎn)生細(xì)胞克隆，保證了后續(xù)大量高效的抗體產(chǎn)生。這種制備方法可用于制備高度特異性和高親和力的單克隆抗體，以滿足科學(xué)研究、生物藥物開發(fā)等領(lǐng)域的需求。
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