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小鼠hist1h4i基因蛋白表達(dá)敲除技術(shù)

日期:2023-05-11 10:54:01


    Hist1h4i屬于H4組蛋白家族,它在哺乳動(dòng)物中由HIST1H4I基因編碼。作為一種核心組蛋白,Hist1h4i參與到細(xì)胞核染色質(zhì)的緊密度調(diào)節(jié)和表觀遺傳修飾中,對(duì)細(xì)胞生長和分化等生物學(xué)過程發(fā)揮著重要作用。
 
    為了深入研究Hist1h4i蛋白的功能,在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠模型上進(jìn)行了基因敲除實(shí)驗(yàn)?;蚯贸夹g(shù)是一種將特定基因從染色體中刪除或失活的方法,以研究該基因在生物學(xué)過程中的作用。
 
    通過構(gòu)建Hist1h4i基因敲除小鼠模型,研究者們成功地將該基因在小鼠中沉默了。使用Western blot(wb)和免疫熒光染色等方法檢測結(jié)果表明,Hist1h4i蛋白在敲除小鼠的肝臟、肺、腎和心臟等組織中均得到了有效的沉默。
 
     進(jìn)一步的研究結(jié)果表明,Hist1h4i基因敲除對(duì)小鼠的生長發(fā)育和生存率均沒有明顯影響。然而,與野生型小鼠相比,在Hist1h4i蛋白沉默的小鼠組織中出現(xiàn)了染色質(zhì)緊密度和表觀遺傳修飾的異常,導(dǎo)致了基因表達(dá)譜和細(xì)胞功能的改變。
 
     對(duì)Hist1h4i基因敲除小鼠心臟進(jìn)行的RNA-seq數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),在Hist1h4i蛋白沉默的小鼠心臟組織中,與野生型小鼠相比,有200多個(gè)基因表達(dá)發(fā)生了改變,其中包括多個(gè)重要的信號(hào)通路和基因調(diào)控因子。此外,Hist1h4i基因敲除小鼠中的細(xì)胞凋亡和腫瘤相關(guān)信號(hào)通路也表現(xiàn)出了明顯異常。
 
     Hist1h4i基因敲除技術(shù)在小鼠模型中被成功地應(yīng)用于研究Hist1h4i蛋白的功能。該研究結(jié)果表明,Hist1h4i蛋白參與到了小鼠的基因表達(dá)譜和細(xì)胞功能調(diào)控中,對(duì)心血管系統(tǒng)的發(fā)育和功能具有特殊作用。這一研究成果拓展了我們對(duì)Hist1h4i蛋白生物學(xué)功能的認(rèn)識(shí),為進(jìn)一步研究其在疾病相關(guān)通路中的作用提供了重要依據(jù)。