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重組dna技術(shù)中常用的工具酶有哪些?

日期:2023-09-28 15:31:11


    重組DNA技術(shù)是指利用分子生物學(xué)方法將外源DNA序列與目標(biāo)DNA序列進(jìn)行拼接、克隆和表達(dá)的一系列技術(shù),其核心是DNA重組。在重組DNA技術(shù)中,常見(jiàn)的工具酶包括:

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?    質(zhì)粒限制酶:如EcoRI、BamHI、HindIII等,用于切割質(zhì)粒和DNA片段。
 
?    DNA連接酶:如T4 DNA連接酶、Taq DNA連接酶等,用于將DNA片段連接成完整的DNA分子。
 
?    外切酶:如Alkaline Phosphatase、Shrimp Alkaline Phosphatase等,用于去除質(zhì)粒內(nèi)部的過(guò)量的單鏈末端,防止自身重連。
 
?    核酸合成酶:如Taq聚合酶、Pfu聚合酶等,用于擴(kuò)增DNA片段。
 
?    T4DNA解旋酶:用于線性化閉環(huán)DNA,以便于取出DNA片段。
 
?    磷酸二酯酶:用于從phosphodiester鏈上去除2-5'磷酸單核苷酸(如T4 PNK),或者添加2-5'磷酸單核苷酸(如RADEY Plasmid labeling kit)
 
?    核酸電泳酶:如Agarase、Algarase等,用于提取目的DNA片段。
 
?    不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮头椒赡苄枰褂貌煌愋偷拿富蚴敲傅淖兎N,因此在選擇工具酶時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇。