elisa檢測(cè)的反應(yīng)原理及常用方法類型？

日期：2023-06-27 15:49:01

ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，用于檢測(cè)抗體或抗原的存在和濃度。ELISA的反應(yīng)原理基于抗原與特異性抗體的結(jié)合，并利用酶底物的反應(yīng)產(chǎn)生可視化信號(hào)。

ELISA的常用方法類型包括：

直接ELISA：將待測(cè)抗原直接吸附到微孔板上，然后加入特異性酶標(biāo)記的抗體與其結(jié)合。最后加入酶底物，在酶的催化下產(chǎn)生發(fā)色信號(hào)。根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度可以定量分析抗原的濃度。

間接ELISA：將待測(cè)抗原吸附到微孔板上，然后加入特異性抗體，如一抗。隨后加入與一抗結(jié)合的酶標(biāo)記的二抗，再加入酶底物產(chǎn)生發(fā)色反應(yīng)。間接ELISA具有較高的靈敏度和特異性。

競(jìng)爭(zhēng)ELISA：將已知濃度的抗原與酶標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體。待測(cè)樣品中的抗原會(huì)與酶標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體，從而影響發(fā)色反應(yīng)的強(qiáng)度。根據(jù)信號(hào)的變化可以推斷出待測(cè)樣品中抗原的濃度。

間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA：將抗原吸附到微孔板上，然后加入特異性抗體與其結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的對(duì)抗體，該對(duì)抗體能夠與特異性抗體結(jié)合。通過(guò)對(duì)特異性抗體與對(duì)抗體結(jié)合的酶標(biāo)記的檢測(cè)，可以判斷待測(cè)樣品中抗原的濃度。

間接雙抗ELISA：將特異性抗原吸附到微孔板上，然后加入預(yù)先復(fù)合的酶標(biāo)記的一抗和二抗，二抗與一抗結(jié)合。通過(guò)檢測(cè)酶標(biāo)記的二抗的活性，可以得到特異性抗原的濃度。

ELISA方法的選擇取決于需要檢測(cè)的抗原或抗體以及實(shí)驗(yàn)的具體要求。每種ELISA方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍，研究者在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需要綜合考慮樣品性質(zhì)、目標(biāo)抗原或抗體的特性等因素，選擇合適的ELISA方法來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。