elisa檢測抗體效價的步驟
日期：2023-08-03 13:19:14
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種常用于測定抗體效價的方法之一。下面是一般 ELISA 檢測抗體效價的步驟：
涂覆抗原：將特定的抗原溶液均勻地涂覆在固相載體（如微孔板）表面，使其吸附在載體上。這個抗原可以是目標抗原或?qū)?yīng)的人工合成肽段。
孵育樣品：加入待測的抗體樣品（如血清）到涂覆好的載體上，讓待測的抗體與抗原結(jié)合。
洗滌：通過洗滌去除非特異性結(jié)合的物質(zhì)。
加入二抗：加入與待測抗體物種來源不同的標記二抗，該二抗能夠識別和結(jié)合待測抗體的Fc片段。
洗滌：再次通過洗滌去除未結(jié)合的二抗。
加入底物：加入底物（如某些底物酶的底物），底物能夠與標記二抗上的酶發(fā)生反應(yīng)并產(chǎn)生可測量的信號。
反應(yīng)終止：通過加入適當?shù)脑噭┩Ｖ沟孜锏姆磻?yīng)。
讀取結(jié)果：使用光譜儀或酶標儀等設(shè)備測量底物反應(yīng)產(chǎn)生的光吸光度或熒光強度，這個信號與抗體效價相關(guān)。
通過檢測不同稀釋倍數(shù)的待測抗體樣品，可以確定抗體效價。一般而言，抗體效價是通過對比待測樣品與已知效價的陽性對照進行計算和比較得出的。
具體的 ELISA 檢測步驟和試劑盒的使用方法可能會有所不同，因此在實際操作中還需要參考相應(yīng)的試劑盒說明書。
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