酶聯(lián)免疫試劑盒組成部分及作用
日期:2023-09-27 13:46:18
酶聯(lián)免疫試劑盒是常用于檢測(cè)和定量分析生物樣本中特定蛋白質(zhì)、抗體等分子的方法。它通常由以下幾個(gè)組成部分構(gòu)成,并且每個(gè)組成部分都有其特定的作用:
酶標(biāo)記抗體/酶標(biāo)記物:這是試劑盒中的關(guān)鍵成分,它是一種抗體,將與待檢測(cè)分子特異性結(jié)合的抗體與酶(如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等)進(jìn)行化學(xué)結(jié)合。酶標(biāo)記抗體的作用是在試劑盒運(yùn)行過(guò)程中,與待檢測(cè)分子形成復(fù)合物,并提供酶活性用于信號(hào)放大。

待檢測(cè)樣本(Sample):這是被測(cè)試的生物樣本,可能是血清、血漿、尿液、細(xì)胞上清液等。待檢測(cè)樣本中含有我們感興趣的分子(如抗原、抗體),需要通過(guò)酶聯(lián)免疫試劑盒來(lái)定量檢測(cè)其濃度或存在與否。
捕獲抗體(Capture Antibody):這是特異性針對(duì)待檢測(cè)分子的抗體,其被固定在試劑盒的微孔板表面。捕獲抗體的作用是捕獲待檢測(cè)樣本中的目標(biāo)分子,通過(guò)特異性結(jié)合來(lái)進(jìn)行分離與富集。
標(biāo)準(zhǔn)品/質(zhì)控樣本(Standard/Control Sample):這是一系列已知濃度的參考物質(zhì),用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣本。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度可以覆蓋待檢測(cè)樣本中可能存在的范圍,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以計(jì)算出待檢測(cè)樣本中目標(biāo)分子的濃度。
顯色底物(Substrate):這是一種顯色或熒光底物,它能夠與酶反應(yīng)產(chǎn)生可見(jiàn)或可測(cè)量的信號(hào)。常見(jiàn)的顯色底物有TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)和ABTS(2,2'-氨基二乙基苯并硫酚),熒光底物如發(fā)光酶底物等。
停止液(Stop Solution):當(dāng)?shù)孜锓磻?yīng)完成后,停止液的加入可以終止酶反應(yīng),并防止進(jìn)一步的信號(hào)放大。停止液的添加使讀數(shù)結(jié)果穩(wěn)定。
通過(guò)以上組成部分的配合,酶聯(lián)免疫試劑盒可以通過(guò)酶標(biāo)記抗體與待檢測(cè)分子的特異性結(jié)合、底物反應(yīng)與信號(hào)生成,來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本中目標(biāo)分子的定量檢測(cè)。這使得酶聯(lián)免疫試劑盒在生命科學(xué)研究、臨床診斷和藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。