人肝細(xì)胞生長因子HGF酶聯(lián)免疫試劑盒說明書?
日期：2025-03-11 13:47:32
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以下是一份人肝細(xì)胞生長因子 HGF 酶聯(lián)免疫試劑盒說明書示例：
1、基本信息
產(chǎn)品名稱：人肝細(xì)胞生長因子（HGF）ELISA 試劑盒
英文名稱：Human Hepatocyte Growth Factor (HGF) ELISA Kit
檢測方法：ELISA 酶聯(lián)免疫吸附法
實(shí)驗(yàn)類型：雙抗體夾心法
應(yīng)用：僅用于科研，不能用于臨床診斷
適應(yīng)物種：人
保存條件：2-8℃
有效期：6 個(gè)月
2、試劑盒組成
3、樣本類型及處理
血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
4、檢測范圍
不同品牌檢測范圍有所不同，如華美生物在說明書中特別指出具體檢測范圍的常規(guī)值；cusabio為 15.6 pg/mL-1000 pg/mL。
5、操作步驟
試劑準(zhǔn)備：標(biāo)準(zhǔn)品系列稀釋在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存，稀釋前振蕩混勻；洗滌緩沖液用蒸餾水 50 倍稀釋。
加樣：根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品 50μl 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50μl 于反應(yīng)孔內(nèi)，立即加入 50μl 的生物素標(biāo)記的抗體，蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 1 小時(shí)。
洗滌：甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復(fù) 3 次，若用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
加酶：每孔加入 80μl 的親和鏈酶素 - HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30 分鐘。
再次洗滌：操作同步驟 3。
顯色：每孔加入底物 A、B 各 50μl，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 10 分鐘，避免光照。
終止：取出酶標(biāo)板，迅速加入 50μl 終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
測定：在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
6、注意事項(xiàng)
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，需稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)乘以總稀釋倍數(shù)。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
避免直接接觸終止液和底物 A、B，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
以下是一份人肝細(xì)胞生長因子 HGF 酶聯(lián)免疫試劑盒說明書示例：
1、基本信息
產(chǎn)品名稱：人肝細(xì)胞生長因子（HGF）ELISA 試劑盒
英文名稱：Human Hepatocyte Growth Factor (HGF) ELISA Kit
檢測方法：ELISA 酶聯(lián)免疫吸附法
實(shí)驗(yàn)類型：雙抗體夾心法
應(yīng)用：僅用于科研，不能用于臨床診斷
適應(yīng)物種：人
保存條件：2-8℃
有效期：6 個(gè)月
2、試劑盒組成
| 試劑盒成份 | 96 孔配置 | 48 孔配置 |
| 酶標(biāo)板 | 1 塊板（96T） | 半塊板（48T） |
| 塑料膜板蓋 | 1 塊 | 半塊 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 1 瓶（0.6ml） | 1 瓶（0.3ml） |
| 空白對照 | 1 瓶（1.0ml） | 1 瓶（0.5ml） |
| 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1 瓶（5ml） | 1 瓶（2.5ml） |
| 生物素標(biāo)記的抗 HGF 抗體 | 1 瓶（6ml） | 1 瓶（3.0ml） |
| 親和鏈酶素 - HRP | 1 瓶（10ml） | 1 瓶（5.0ml） |
| 洗滌緩沖液 | 1 瓶（20ml） | 1 瓶（10ml） |
| 底物 A | 1 瓶（6.0ml） | 1 瓶（3.0ml） |
| 底物 B | 1 瓶（6.0ml） | 1 瓶（3.0ml） |
| 終止液 | 1 瓶（6.0ml） | 1 瓶（3.0ml） |
3、樣本類型及處理
血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
4、檢測范圍
不同品牌檢測范圍有所不同，如華美生物在說明書中特別指出具體檢測范圍的常規(guī)值；cusabio為 15.6 pg/mL-1000 pg/mL。
5、操作步驟
試劑準(zhǔn)備：標(biāo)準(zhǔn)品系列稀釋在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存，稀釋前振蕩混勻；洗滌緩沖液用蒸餾水 50 倍稀釋。
加樣：根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品 50μl 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50μl 于反應(yīng)孔內(nèi)，立即加入 50μl 的生物素標(biāo)記的抗體，蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 1 小時(shí)。
洗滌：甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干，重復(fù) 3 次，若用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
加酶：每孔加入 80μl 的親和鏈酶素 - HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30 分鐘。
再次洗滌：操作同步驟 3。
顯色：每孔加入底物 A、B 各 50μl，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 10 分鐘，避免光照。
終止：取出酶標(biāo)板，迅速加入 50μl 終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
測定：在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
6、注意事項(xiàng)
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，需稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)乘以總稀釋倍數(shù)。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
避免直接接觸終止液和底物 A、B，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
