ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒的主要組成成分有哪些？
日期：2025-04-02 09:57:00
通常包括包被有抗原或抗體的微孔板、酶標(biāo)記物（酶標(biāo)抗體或酶標(biāo)抗原）、底物溶液、緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照等。有些試劑盒還可能包含樣本稀釋液、終止液等。
ELISA 酶聯(lián)免疫試劑盒主要由以下幾類成分組成：
固相載體：通常是聚苯乙烯微量反應(yīng)板，具有良好的吸附性能，能使抗原或抗體牢固地結(jié)合在其表面，以便進(jìn)行免疫反應(yīng)。
包被抗原或抗體：是試劑盒中的關(guān)鍵成分，用于固定在固相載體上，與樣品中的目標(biāo)物質(zhì)（抗體或抗原）發(fā)生特異性結(jié)合。
酶標(biāo)抗體或抗原：這是一種將酶與抗體或抗原通過化學(xué)方法偶聯(lián)而成的試劑。酶標(biāo)抗體或抗原能與已結(jié)合在固相載體上的目標(biāo)物質(zhì)特異性結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。常用的酶有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）等。
標(biāo)準(zhǔn)品：是已知濃度的目標(biāo)物質(zhì)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，建立吸光度與濃度之間的關(guān)系曲線，從而根據(jù)樣品的吸光度計(jì)算出其目標(biāo)物質(zhì)的含量。
底物：是能被酶催化發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的物質(zhì)，在酶的作用下會(huì)發(fā)生顏色變化或其他可檢測(cè)的信號(hào)變化。如 HRP 常用的底物是四甲基聯(lián)苯胺（TMB），在 HRP 的催化下，TMB 會(huì)從無色變?yōu)樗{(lán)色，加入終止液后變?yōu)辄S色，可通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。
緩沖液：包括包被緩沖液、洗滌緩沖液、稀釋緩沖液和終止液等。包被緩沖液用于將抗原或抗體包被到固相載體上；洗滌緩沖液用于在免疫反應(yīng)過程中洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少非特異性吸附；稀釋緩沖液用于稀釋樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑等；終止液用于終止酶促反應(yīng)，使反應(yīng)停止在某一時(shí)刻，以便進(jìn)行結(jié)果檢測(cè)。
其他成分：可能還包括防腐劑，用于防止試劑在儲(chǔ)存過程中被微生物污染；封閉劑，如牛血清白蛋白（BSA）或明膠等，用于封閉固相載體上未被包被的位點(diǎn)，減少非特異性結(jié)合。
