轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，它通過(guò)改變腫瘤微環(huán)境（TME）的性質(zhì)，使其朝向免疫抑制狀態(tài)，從而促使癌細(xì)胞能夠侵襲并傳播到遠(yuǎn)處的部位。癌細(xì)胞通過(guò)免疫檢查點(diǎn)來(lái)失活腫瘤浸潤(rùn)的CD8+ T細(xì)胞，其中包括PD-L1等配體介導(dǎo)的檢查點(diǎn)。雖然旨在靶向免疫檢查點(diǎn)的臨床策略已經(jīng)改善了患有各種不同腫瘤類型的患者的生存狀況，包括肺腺癌（LUAD）。但只有少數(shù)癌癥患者從檢查點(diǎn)抑制劑療法中受益，大多數(shù)對(duì)治療的反應(yīng)患者最終會(huì)獲得對(duì)這種治療方式的耐藥性。因此，迫切需要克服耐藥性的檢查點(diǎn)抑制劑療法策略。這種免疫抑制的TME是由癌細(xì)胞釋放的分泌信號(hào)引起的，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞減少，與此同時(shí)髓系源抑制細(xì)胞的浸潤(rùn)增加。然而，癌細(xì)胞如何激活分泌性Rabs蛋白以達(dá)到高分泌狀態(tài)，目前還不清楚。

EMT: (Epithelial-to-mesenchymal transition) 是一種細(xì)胞固有的生物學(xué)過(guò)程，使癌細(xì)胞從上皮細(xì)胞形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)殚g質(zhì)細(xì)胞形態(tài)，這導(dǎo)致細(xì)胞的極性從頂?shù)讟O性轉(zhuǎn)變?yōu)榍昂髽O性。這意味著細(xì)胞的器官和基于肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)會(huì)定向到細(xì)胞的前沿，以促進(jìn)細(xì)胞的定向運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移。

轉(zhuǎn)錄因子家族（如ZEB、Twist、Snail）推動(dòng)EMT過(guò)程。這些轉(zhuǎn)錄因子控制著廣泛的轉(zhuǎn)錄組，部分原因是因?yàn)樗鼈兡軌虺聊鞣N微小RNA。在轉(zhuǎn)移性癌細(xì)胞中，高水平的ZEB1生成一個(gè)緊湊、極化的高爾基體，建立前后極性軸，該軸與焦點(diǎn)斑（FAs）相互關(guān)聯(lián)，將前沿錨定到基質(zhì)上，并且當(dāng)癌細(xì)胞前進(jìn)時(shí)，焦點(diǎn)斑會(huì)解體、內(nèi)吞并被運(yùn)輸回前沿。這個(gè)過(guò)程由Rab8A協(xié)助進(jìn)行。

因此作者提出假設(shè)，他認(rèn)為EMT激活胞吐出的囊泡運(yùn)輸網(wǎng)絡(luò)，以協(xié)調(diào)多種促轉(zhuǎn)移功能，包括免疫抑制和腫瘤細(xì)胞入侵。為了驗(yàn)證這個(gè)假設(shè)，作者使用了從人類和基因工程小鼠中獲得的肺腺癌（LUAD）細(xì)胞系。這些細(xì)胞系中，高度轉(zhuǎn)移性的細(xì)胞在外界信號(hào)的刺激下會(huì)發(fā)生部分的EMT，或者反向過(guò)程。而轉(zhuǎn)移到能力較差的細(xì)胞則在外界信號(hào)的刺激下不會(huì)發(fā)生形態(tài)變化。

圖1. ZEB1通過(guò)miR-148a激活胞外性Rab（圖G：gtp結(jié)合Rab6A測(cè)定。Rab6A與BICD2相關(guān)的WB分析）

武漢華美生物助力科研進(jìn)步：

作者的研究結(jié)果驗(yàn)證了一個(gè)模型，即ZEB1能夠加速高爾基體后的胞吐過(guò)程，從而激活一個(gè)分泌性程序，該程序協(xié)調(diào)了多種促進(jìn)轉(zhuǎn)移的功能。這一發(fā)現(xiàn)可能有助于克服免疫檢查點(diǎn)抑制劑耐藥性。

圖2. 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ褪疽鈭D

ZEB1解除miR-148a依賴性沉默對(duì)Rab6A、Rab8A及其相關(guān)GEFs的影響，從而加速Rab6A和Rab8A依賴性的囊泡胞吐滲透運(yùn)輸，攜帶促進(jìn)FA周轉(zhuǎn)的貨物（例如MMP14），并建立免疫抑制性的腫瘤微環(huán)境（例如細(xì)胞因子和ATX），以促進(jìn)癌癥轉(zhuǎn)移。

在這里，作者展示了肺腺癌（LUAD）細(xì)胞通過(guò)EMT激活的分泌程序獲得轉(zhuǎn)移能力，該程序協(xié)調(diào)腫瘤微環(huán)境中的癌細(xì)胞侵襲和免疫抑制。重要的是，他證明了分泌阻斷能夠逆轉(zhuǎn)獲得性抗PD-L1檢查點(diǎn)阻斷的耐藥性，這是一個(gè)新興的臨床問(wèn)題。這些發(fā)現(xiàn)代表了一個(gè)概念性的飛躍，即EMT通過(guò)細(xì)胞外機(jī)制推動(dòng)LUAD轉(zhuǎn)移，并為設(shè)計(jì)克服免疫療法抵抗的臨床策略奠定了基礎(chǔ)。

Recombinant Mouse Protein bicaudal D homolog 2(Bicd2),partial (CSB-EP835631MO)

High Purity Validated by SDS-PAGE

(Tris-Glycine gel) Discontinuous SDS-PAGE (reduced) with 5% enrichment gel and 15% separation gel.