神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)單克隆抗體
日期:2017-06-26 14:53:14
一、GFAP結(jié)構(gòu)特征
人類GFAP基因定位于17號染色體長臂2區(qū)1帶上,由9個(gè)外顯子和8個(gè)內(nèi)含子組成;其蛋白質(zhì)序列中有4個(gè)卷曲結(jié)構(gòu)如下圖。GFAP主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞中,參與細(xì)胞骨架的構(gòu)成并維持其張力強(qiáng)度。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,星形膠質(zhì)細(xì)胞前體-即波形蛋白是中間絲蛋白的主要存在形式。星形膠質(zhì)細(xì)胞的成熟伴隨著波狀蛋白向GFAP的轉(zhuǎn)化,GFAP被視為星形膠質(zhì)細(xì)胞成熟化的標(biāo)記物,GFAP的表達(dá)水平受發(fā)育過程和病理狀態(tài)的調(diào)節(jié)。其在軟骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肝星形細(xì)胞也有表達(dá)。但外周系統(tǒng)所表達(dá)的GFAP不能被中樞神經(jīng)系統(tǒng)的GFAP單克隆抗體檢測出,表明兩個(gè)來源的GFAP可能在結(jié)構(gòu)上存在差異。
GFAP蛋白的線性結(jié)構(gòu),功能結(jié)構(gòu)和關(guān)鍵的修飾位點(diǎn)
(圖片源自:Trends in Neurosciences)
二、GFAP的主要功能
目前認(rèn)為GFAP的合成是星形膠質(zhì)細(xì)胞分化過程的重要元素,并且與各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷存在關(guān)聯(lián)。通過測定GFAP基因的轉(zhuǎn)錄過程來研究發(fā)育中和疾病狀態(tài)下的中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著重要的意義。此外,GFAP的免疫組化染色有助于癌細(xì)胞與良性增生的鑒別,而且在小管癌中對于癌性小管和良性增生性小管的鑒別具有指導(dǎo)意義。
三、GFAP的應(yīng)用
我們生產(chǎn)的GFAP單克隆抗體(CSB-MA009369A0m,100 µg/50 µg)可應(yīng)用于ELISA、WB、IHC、IF、FC檢測。
WB:
GFAP
GFAP抗體與大鼠小鼠的腦組織均具有陽性反應(yīng),在WB檢測中出現(xiàn)單一目的條帶(50 Kd)。該抗體對于鼠腦組織具有較強(qiáng)的親和力,當(dāng)抗體稀釋1000倍(2.7 ug/ml)使用的時(shí)候,仍然呈現(xiàn)單一的目的條帶。
IHC:
GFAP抗體在腦組織和神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織里表達(dá),定位在細(xì)胞質(zhì)中,呈強(qiáng)陽性。
IF:
GFAP抗體在U251、SY5Y、U87神經(jīng)類細(xì)胞的胞質(zhì)中檢測到強(qiáng)發(fā)光信號。
FC:
GFAP
關(guān)于GFAP抗體的流式驗(yàn)證,市場上只有少數(shù)幾家的公司做了該數(shù)據(jù)分析(其中較好的一家數(shù)據(jù)為:實(shí)驗(yàn)組的發(fā)光強(qiáng)度是同型無關(guān)對照組發(fā)光強(qiáng)度的10倍)。在流式細(xì)胞檢測中,我們生產(chǎn)的抗體在SY5Y細(xì)胞中出現(xiàn)強(qiáng)陽性信號,且實(shí)驗(yàn)組熒光強(qiáng)度是對照組的熒光強(qiáng)度的30倍,達(dá)到目前市場的領(lǐng)先水平。