一、PODXL的結(jié)構(gòu)特征

PODXL屬于CD34家族成員之一，是富含負(fù)電荷的唾液黏蛋白，屬于I型跨膜糖蛋白，包括高度唾液酸化的胞外結(jié)構(gòu)域和一個短小的胞質(zhì)尾區(qū)，其中胞外結(jié)構(gòu)域包含大量可與N-和O-結(jié)合的糖基化位點，尾區(qū)帶有蛋白磷酸化結(jié)合位點。

圖片來自：文獻(xiàn)【The Role of Podocalyxin in Health and Disease】

PODXL’s structure. Podocalyxin has an extensively O-glycosylated (ver-tical lines) and sialylated (triangles) extracellular mucin domain (purple), several sites of N-glycosylation (red circles), and a cysteine-containing globular domain (green). This is followed by a juxtamembrane stalk (blue), a single-pass transmembrane domain (pink), and an intracellular domain (green) with putative phosphorylation sites and a C-terminal DTHL sequence for interaction with PDZ domains.

PODXL又稱為PODXL樣蛋白1，由腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和足細(xì)胞合成，在足細(xì)胞成熟過程中固定于腎小球足細(xì)胞頂膜。此外，也存在于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和壁層上皮細(xì)胞、造血干細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞以及腫瘤細(xì)胞。

二、PODXL的主要功能

PODXL位于質(zhì)膜上，遍及整個細(xì)胞體分布，不依賴裂孔隔膜的完整而能夠保持穩(wěn)定，PODXL已成為足細(xì)胞診斷中最穩(wěn)定的標(biāo)記物。PODXL主要表達(dá)在腎小球上皮細(xì)胞而不表達(dá)于其他的尿道上皮細(xì)胞，故用它來定量檢測尿中足細(xì)胞的脫落，對評價腎小球疾病中足細(xì)胞的損傷具有臨床意義。

三、PODXL單克隆抗體（CSB-MA134471A0m）的應(yīng)用     

我們生產(chǎn)的PODXL單克隆抗體可應(yīng)用于ELISA、WB、IHC、IF、IP、FC檢測。

WB：

4D2G7細(xì)胞株生產(chǎn)的抗體（1:250）在天然樣本Hela、293、A549中檢測，出現(xiàn)目的條帶（59 KD），且可以識別小鼠腦組織（1:1500）和大鼠腦、心、腎組織（1:500）中出現(xiàn)目的帶。

IHC：

4D2G7在子宮內(nèi)膜癌和腎里面表達(dá)強烈，呈明顯陽性。在睪丸、胰腺癌、肺癌、胃癌中未檢測到陽性信號。

IF：

4D2G7細(xì)胞株產(chǎn)生的抗體在Hela、PC3、A549、Ntera2中檢測到陽性信號且定位于質(zhì)膜。

IP：

在IP實驗中，4D2G7細(xì)胞株產(chǎn)生的抗單克隆體在293中檢測到陽性信號。

FC：

4D2G7-Hela

PODXL單抗的流式分析發(fā)現(xiàn)，在Hela細(xì)胞中檢測到強陽性信號，且發(fā)光強度為105是無關(guān)對照組細(xì)胞發(fā)光強度的100倍。其他公司生產(chǎn)的該單抗的流式檢測結(jié)果[實驗組細(xì)胞組發(fā)光強度/無關(guān)對照組細(xì)胞發(fā)光強度]主要集中在5-30倍。