Part I明星產(chǎn)品

Part II 文獻(xiàn)詳情

題目：Simvastatin Prevents Progression of Acute on Chronic Liver Failure in Rats With Cirrhosis and Portal Hypertension辛伐他汀可阻止大鼠中由肝硬化門(mén)脈高壓導(dǎo)致的慢加急性肝衰竭
期刊：Gastroenterology
影響因子：20.773

研究背景及目的：

細(xì)菌感染可加快肝硬化及其臨床病變，最終發(fā)展成慢加急性肝衰竭（ACLF）。ACLF主要臨床表現(xiàn)包括急性失代償，器官衰竭和短時(shí)期內(nèi)的高死亡率。由于對(duì)肝硬化患者ACLF細(xì)胞和分子機(jī)制知之甚少，因此一直沒(méi)有有效的治療手段。在本研究中，Dinesh Mani Tripathi和他的小伙伴們開(kāi)發(fā)了一種與敗血癥相關(guān)的ACLF臨床前模型，以便于ACLF發(fā)病機(jī)制的研究及辛伐他汀抗ACLF作用的評(píng)估。

結(jié)論：

1、在對(duì)肝硬化大鼠的研究中，作者發(fā)現(xiàn)LPS可以促進(jìn)ACLF的發(fā)生發(fā)展，加重慢性肝病的并發(fā)癥并減少存活時(shí)間。
2、辛伐他汀可減輕LPS誘導(dǎo)的ACLF大鼠的炎癥和肝損傷，支持其用于治療晚期慢性肝病患者。

結(jié)果：

• LPS可通過(guò)加劇肝內(nèi)微血管功能障礙、肝臟炎癥與氧化應(yīng)激，同時(shí)增加肝星狀細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，進(jìn)一步加重肝硬化大鼠的門(mén)靜脈高壓癥。
• 肝硬化大鼠經(jīng)LPS處理后，其存活時(shí)間明顯短于肝硬化大鼠對(duì)照組。
• 辛伐他汀可預(yù)防大多數(shù)ACLF并發(fā)癥并增加存活時(shí)間。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，辛伐他汀可增強(qiáng)肝竇功能，降低門(mén)脈高壓和炎癥及氧化指標(biāo)。
• 該藥物顯著降低轉(zhuǎn)氨酶，總膽紅素和氨的水平，有效抑制LPS介導(dǎo)的肝硬化大鼠肝組織中HSC的活化。

1、外源性給予LPS對(duì)肝硬化大鼠的全身作用

本研究中，向肝硬化動(dòng)物給予外源性LPS可以顯著升高內(nèi)毒素血癥，而內(nèi)毒素血癥與全身血液動(dòng)力學(xué)和腎功能障礙息息相關(guān)（Suppl. Fig 2）。

2、LPS可加重肝硬化大鼠的門(mén)靜脈高壓癥和肝臟微循環(huán)功能障礙，而辛伐他汀可預(yù)防ACLF的不良反應(yīng)

與空白組相比，失代償和代償性CCl4肝硬化大鼠腹腔注射LPS后，其門(mén)靜脈壓力（PP）呈顯著增加趨勢(shì)，在代償性TAA肝硬化動(dòng)物中也觀察到相似結(jié)果（表1a），但門(mén)靜脈血流（PBF）有顯著變化，因此作者推斷ACLF門(mén)靜脈高壓增加是由于肝血管阻力（HVR）增高所致。同樣，作者在靜脈注射LPS的處理組中也觀察到了類似的結(jié)果（Supple. Table 3）。另外，在離體肝臟微循環(huán)分析中，作者觀察到LPS處理組的門(mén)靜脈灌注壓顯著增加（Fig 1 top），并且肝血管擴(kuò)張對(duì)乙酰膽堿的反應(yīng)減弱（Fig 1 bottom），這也進(jìn)一步證實(shí)了肝臟微血管功能障礙會(huì)隨著ACLF患病時(shí)間推移而加重。
ACLF相關(guān)潛在干預(yù)治療研究表明，辛伐他汀可以有效的阻止LPS誘導(dǎo)的門(mén)靜脈高壓惡化。如Table 1a所示，與LPS處理組相比，辛伐他汀治療組的PP明顯降低，此時(shí)也并未觀察到PBF的變化，這也進(jìn)一步表明HVR降低是PP改善的原因。事實(shí)上，在失代償性CCl4大鼠中，HVR對(duì)辛伐他汀的敏感度降低，但這一現(xiàn)象并未在BDL動(dòng)物中觀察到。盡管在CCl4代償性肝硬化動(dòng)物中，辛伐他汀處理組的PBF或HVR沒(méi)有顯著變化，但有趣的是MAP卻略有改善。這與體內(nèi)觀察到的改善相一致。此外，辛伐他汀還可以防止LPS誘導(dǎo)的ACLF在離體門(mén)靜脈灌注壓（Fig 1 top）和肝血管擴(kuò)張反應(yīng)中對(duì)乙酰膽堿的血流動(dòng)力學(xué)惡化（Fig 1 bottom）。

Table 1a LPS和辛伐他汀對(duì)失代償性和代償性晚期慢性肝病（ACLD）大鼠肝臟和全身血流動(dòng)力學(xué)的影響

圖1：辛伐他汀對(duì)晚期慢性肝?。ˋCLD）大鼠的肝微血管功能的影響

3、他汀類藥物可以有效緩解ACLF所引起的驗(yàn)證及氧化應(yīng)激進(jìn)一步加劇

如Fig 2，Suppl. Fig 3和Suppl. Fig 4所示，作者通過(guò)檢測(cè)促炎與抗炎因子的變化發(fā)現(xiàn)LPS可以顯著促進(jìn)肝硬化大鼠全身和肝臟炎癥進(jìn)一步惡化。同時(shí)作者通過(guò)觀察NETs的形成，發(fā)現(xiàn)這種炎性爆發(fā)與肝臟中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和中性粒細(xì)胞活性的顯著增加有關(guān)（Fig 3和Suppl. Fig 5）。如Fig 2和Fig 3所示，辛伐他汀可預(yù)防失代償性肝硬化大鼠因內(nèi)毒素血癥引起的炎癥性爆發(fā)，盡管其抗炎作用在BDL臨床前模型中不太明顯（Fig2-3和supple. Fig 3-4）。在補(bǔ)償?shù)腃Cl4大鼠中也觀察到類似的趨勢(shì)（Suppl. Fig 5）。
如Fig 4A-B所示，LPS處理組過(guò)氧化物水平顯著升高及過(guò)氧亞硝酸鹽的非顯著增加，說(shuō)明LPS加劇了失代償性肝硬化大鼠的肝臟氧化應(yīng)激。有趣的是，氧化解除與肝eNOS活性明顯降低有關(guān)(Fig 4C-D)。辛伐他汀在失代償性肝硬化模型(Fig 4A-4B)和CCl4模型(fFig 4C)中均能抑制ACLF所致氧化應(yīng)激的增加(Fig 4A-4B)，并改善P-eNOS/eNOS的比值(Fig 4C)，但對(duì)BDL模型(Fig 4D)則無(wú)明顯影響。

Fig 2. ACLF失代償性ACLD大鼠的肝臟炎癥

Fig 3. 失代償期ACLF失代償性ACLD大鼠中性粒細(xì)胞和NETs的檢測(cè)

Fig 4. 辛伐他汀對(duì)ACLF失代償性肝硬化大鼠氧化應(yīng)激和NO通路的影響

4、辛伐他汀可以改善由LPS導(dǎo)致的肝狀星性細(xì)胞表型惡化現(xiàn)象

通過(guò)對(duì)ACLF期間肝微循環(huán)惡化分子機(jī)制的進(jìn)一步研究，作者發(fā)現(xiàn)肝臟中α-SMA蛋白表達(dá)和mRNA水平均顯著上調(diào)，表明內(nèi)毒素血癥可以使失代償性肝硬化動(dòng)物HSC急性活化（Fig. 5）。盡管辛伐他汀沒(méi)有改變肝纖維化（數(shù)據(jù)未顯示），但在兩種失代償?shù)母斡不笫竽Ｐ椭蠰PS介導(dǎo)的HSC活化都得到了有效的改善。此外，考慮到ACLF期間中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)增加，作者對(duì)LPS激活的中性粒細(xì)胞是否影響HSC表型進(jìn)行了驗(yàn)證。如Suppl. Fig 6 所示，活化的嗜中性粒細(xì)胞與LX2細(xì)胞的直接共培養(yǎng)會(huì)引起HSC過(guò)度活化，但在間接共培養(yǎng)卻并未觀察到HSC過(guò)度活化。有趣的是，LPS刺激的中性粒細(xì)胞對(duì)LX2表型的不利影響卻在辛伐他汀的作用下得到了有效改善（Supple. Fig 6），表明在LPS誘導(dǎo)ACLF過(guò)程中，中性粒細(xì)胞可能部分介導(dǎo)HSC的激活。

Fig. 5 辛伐他汀對(duì)晚期慢性肝?。ˋCLD）大鼠肝星狀細(xì)胞表型的影響

5、辛伐他汀可以改善ACLF對(duì)肝硬化動(dòng)物存活率的消極影響

首先，作者對(duì)LPS處理后4或24小時(shí)（分別在失代償和代償性的肝硬化動(dòng)物中）大鼠存活進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，非ACLF失代償和代償性肝硬化動(dòng)物無(wú)死亡。相反，LPS治療組，尤其是失代償性肝硬化模型組死亡率明顯高于對(duì)照組（Fig 2），如Table 1b所示，通過(guò)對(duì)存活大鼠中生化指標(biāo)的監(jiān)測(cè)， LPS可以顯著惡化ACLF的作用得到了進(jìn)一步證實(shí)。重要的是，辛伐他汀預(yù)處理能有效改善失代償性肝硬化模型中LPS誘導(dǎo)的ACLF的存活率(Table 2)，并顯著降低轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素和氨含量(Table 1b)。代償性肝硬化大鼠(Table 1b和Table 2)也有類似的趨勢(shì)。

Table 1b LPS和辛伐他汀對(duì)失代償和補(bǔ)償性ACLD大鼠生化指標(biāo)的影響

Table 2失代償和補(bǔ)償性ACLD大鼠的初始和最終動(dòng)物數(shù)量和存活率

討論：

由于LPS施用導(dǎo)致的ACLF的發(fā)展同時(shí)顯著加劇肝臟和全身炎癥，導(dǎo)致已經(jīng)功能失調(diào)的肝微血管系統(tǒng)的嚴(yán)重惡化和肝硬化動(dòng)物的存活率明顯降低。辛伐他汀主要通過(guò)避免炎癥性爆發(fā)，氧化應(yīng)激和竇狀細(xì)胞功能障礙來(lái)預(yù)防這些失調(diào)。綜合本次和之前的研究結(jié)果，作者建議辛伐他汀作為接受ACLF的肝硬化患者的安全且有用的治療策略。 實(shí)際上，大規(guī)模臨床試驗(yàn)將評(píng)估該化合物對(duì)失代償期肝硬化患者的可能有益作用。