1. 什么是CCR9？

1.1 CCR9的結(jié)構(gòu)

CC族趨化因子受體9（CC chemokine receptor 9，CCR9）屬于趨化因子受體家族中的一員，是具有7次跨膜結(jié)構(gòu)的G蛋白偶聯(lián)受體。趨化因子受體家族是一類(lèi)重要的細(xì)胞表面受體，與趨化因子結(jié)合后可以調(diào)控細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、分化、增殖等多種功能。趨化因子受體可分為四個(gè)亞家族，分別是CC、CXC、CX3C和C型。其中CCR9屬于CC亞家族（點(diǎn)擊查看趨化因子家族介紹）。CCR9由轉(zhuǎn)錄物A（369個(gè)氨基酸，42 kDa）和轉(zhuǎn)錄物B（357個(gè)氨基酸，40.8 kDa）組成，由于其與CCR6和CCR7在結(jié)構(gòu)和序列上相似，因而被重新命名為CCR9。CCR9發(fā)揮生理學(xué)功能的區(qū)域主要是由65~317個(gè)氨基酸組成的7次跨膜結(jié)構(gòu)（圖1） ^[1-3]。

圖1. CCR9分子結(jié)構(gòu) ^[1]

1.2 CCR9的表達(dá)和功能

CCR9主要表達(dá)于未成熟胸腺細(xì)胞、外周血CD8+T、部分樹(shù)突狀細(xì)胞及小腸內(nèi)皮細(xì)胞，可調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境平衡。受體CCR9與配體CCL25相互作用介導(dǎo)胸腺發(fā)育過(guò)程中未成熟細(xì)胞的遷移以及腸道相關(guān)免疫細(xì)胞的歸巢。研究顯示CCR9在多種疾病中扮演關(guān)鍵角色，如炎癥性腸病、急性肝炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。此外，大量證據(jù)表明CCR9在多種惡性腫瘤中異常高表達(dá)，這種高表達(dá)往往與腫瘤的耐藥、轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后相關(guān)，提示CCR9可能參與了多種與腫瘤進(jìn)展相關(guān)的生物學(xué)活動(dòng)，包括結(jié)腸癌、黑色素瘤、前列腺癌、非小細(xì)胞肺癌等 ^[1-6]。

2. 什么是CCR9的配體？

CCR9的特定配體是胸腺表達(dá)趨化因子（Thymus Expressed Chemokine，TECK）/CCL25。CCL25位于19號(hào)染色體p13.2，屬于CC趨化因子家族。它由150個(gè)氨基酸組成，其中端的23個(gè)氨基酸為信號(hào)肽。CCL25主要表達(dá)于胸腺和小腸上皮細(xì)胞，還可少量表達(dá)于睪丸、腦組織、肝臟和活化的proT細(xì)胞。隨著腫瘤分子生物的深入研究，CCR9及其唯一的天然趨化因子配體CCL25在腫瘤中的調(diào)控作用逐漸被揭露 ^[7-10]。

研究數(shù)據(jù)表明血清CCL25與MMP-9、VEGF-D和AKT均高度相關(guān)，提示PI3K/AKT通路激活及其下游的效應(yīng)細(xì)胞因子（VEGF-D和MMP-9）的表達(dá)有可能受CCR9/CCL25生物軸調(diào)節(jié)。此外，放線菌酮（cycloheximide，CHX）誘導(dǎo)的MOLT4細(xì)胞凋亡可被CCR9/CCL25信號(hào)通路抑制。CCL25與CCR9結(jié)合后，可啟動(dòng)下游信號(hào)通路，活化PI3K并進(jìn)一步磷酸化AKT。AKT的激活可促進(jìn)Bad、GSK-3 β等多種參與細(xì)胞存活的信號(hào)分子的活化，從而促進(jìn)細(xì)胞生存。因此，CCR9和配體CCL25有可能成為癌癥研究的靶向分子 ^[7-10]。

3. CCR9/CCL25在腫瘤中的信號(hào)調(diào)控機(jī)制

3.1 CCR9/CCL25和PI3K/AKT信號(hào)通路

PI3K-Akt信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)傳導(dǎo)途徑之一，大量研究表明，PI3K-Akt信號(hào)通路與多種人類(lèi)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及惡性進(jìn)展密切相關(guān)。該通路受腫瘤相關(guān)基因PTEN、CTMP、SHLP2等內(nèi)源性負(fù)調(diào)控。近期研究發(fā)現(xiàn)CCR9/CCL25生物軸能夠激活PI3K/AKT信號(hào)通路。研究指出CCR9/CCL25激活PI3K/AKT信號(hào)通路參與非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的抗凋亡過(guò)程，調(diào)節(jié)前列腺細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制，并且抑制化療藥物依托泊苷（Etoposide）誘導(dǎo)的前列腺癌細(xì)胞凋亡。在乳腺癌和卵巢癌的研究中，CCR9/CCL25相互作用也抑制了化療藥物誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡。這些研究提示，CCR9/CCL25可能通過(guò)PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡（圖2） ^{[1, 11-13]}。

圖2. CCR9/CCL25和PI3K/AKT信號(hào)通路 ^[1]

3.2 CCR9/CCL25和JAK/STAT信號(hào)通路

JAK/STAT信號(hào)通路是一條快速、高效的從細(xì)胞外到細(xì)胞核的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，JAK/STAT通路的激活，特別是STAT3的激活，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)化具有重要影響。T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫治療是一種有效的腫瘤治療手段，但其主要限制是體內(nèi)產(chǎn)生抗腫瘤細(xì)胞毒性作用的能力較弱。研究發(fā)現(xiàn)，CCR9通過(guò)STAT信號(hào)通路介導(dǎo)CCR9削弱細(xì)胞毒性效應(yīng)作用。而抑制體內(nèi)CCR9表達(dá)可以顯著改善腫瘤特異性T細(xì)胞介導(dǎo)免疫治療的效果。因此，進(jìn)一步研究CCR9/CCL25與JAK/STAT信號(hào)通路之間的關(guān)系，對(duì)于探索新的腫瘤免疫研究方法具有重要意義 ^{[6, 14-15]}。

4. CCR9在腫瘤中的相關(guān)研究

在惡性腫瘤中，趨化因子與其受體結(jié)合參與疾病發(fā)生發(fā)展的所有階段，包括淋巴細(xì)胞募集、新血管生成、腫瘤增殖、存活以及腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。大量的研究證明，CCR9和CCL25在多種癌癥中高度表達(dá)，在腫瘤的侵襲、遷移、耐藥和抗調(diào)亡中發(fā)揮著重要作用，是一個(gè)潛在的腫瘤靶向研究突破點(diǎn)。

4.1 CCR9和T淋巴細(xì)胞白血病研究

在T淋巴細(xì)胞白血病中，CCR9在急性T淋巴細(xì)胞白血病(TALL)和慢性T淋巴細(xì)胞白血病(TCLL)的CD4+陽(yáng)性T細(xì)胞中高表達(dá)，但在正常CD4+陽(yáng)性T細(xì)胞中不表達(dá)。這可能與細(xì)胞增殖、存活以及逃避調(diào)控相關(guān)。研究指出，CCR9和CCL25的相互作用會(huì)影響叉頭轉(zhuǎn)錄因子(FKHR)和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的活化，從而抑制細(xì)胞凋亡信號(hào)通路，抑制惡性腫瘤細(xì)胞的凋亡 ^[16-17]。

另外，CCR9-CCL25在不同類(lèi)型的T淋巴細(xì)胞中表現(xiàn)出不同作用，對(duì)CD4+CD8+雙陽(yáng)性T淋巴細(xì)胞促進(jìn)細(xì)胞發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持，而對(duì)TALL CD4+陽(yáng)性T淋巴細(xì)胞，則促進(jìn)細(xì)胞異常增殖和抑制凋亡 ^[17]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)CCR9可能通過(guò)Notch1信號(hào)途徑調(diào)節(jié)白血病細(xì)胞的生物學(xué)機(jī)制，而CCL25可能通過(guò)調(diào)控凋亡抑制蛋白Livin的水平影響白血病T淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)和凋亡 ^[18]。

4.2 CCR9和結(jié)腸癌研究

CCL25在小腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞中高度表達(dá)。它與CCR9陽(yáng)性T淋巴細(xì)胞結(jié)合后，促使這些細(xì)胞進(jìn)行定向轉(zhuǎn)運(yùn)。因此，在消化系統(tǒng)中，CCR9-CCL25生物軸起著重要作用。結(jié)直腸癌研究表明，CCR9在腺癌和侵襲前結(jié)直腸癌細(xì)胞中顯著高于侵襲性和轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。盡管存在細(xì)胞表達(dá)狀態(tài)未完全驗(yàn)證的情況，但已確定CCR9在結(jié)直腸癌中高表達(dá)。體外研究也證實(shí)，CCR9-CCL25軸能夠顯著促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞的侵襲能力。因此，目前研究顯示CCR9/CL25在結(jié)腸癌中高表達(dá)，與該癌癥的發(fā)展和侵襲過(guò)程密切相關(guān) ^{[9, 19]}。

4.3 CCR9和前列腺癌研究

CCR9/CCL25在前列腺癌中的研究較早，CCR9在前列腺淋巴結(jié)癌細(xì)胞系、前列腺癌細(xì)胞系和正常前列腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)呈遞減梯度分布，其中在前列腺淋巴結(jié)癌細(xì)胞系中的表達(dá)量最高。提示CCR9/CCL25生物軸與前列腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。此外，CCR9/CCL25相互作用調(diào)節(jié)抗凋亡信號(hào)蛋白的活性，在CCL25存在的環(huán)境中，依托泊苷誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡被顯著抑制，使用CCR9拮抗劑阻斷CCR9/CCL25途徑后，這種抑制細(xì)胞凋亡的作用被消除。因此，CCR9的高表達(dá)與前列腺腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲有關(guān)，抑制CCR9/CCL25的相互作用，可有效降低前列腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力 ^[20-21]。

4.4 CCR9和卵巢癌研究

研究通過(guò)組織芯片結(jié)合免疫組織化學(xué)法檢測(cè)上皮性卵巢癌組織中CCR9表達(dá)情況，并分析其與患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，較正常卵巢組織比較，CCR9和CCL25在上皮性卵巢癌中高表達(dá)，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性、組織學(xué)分級(jí)和臨床分期關(guān)系密切。CCR9在卵巢癌組織中高表達(dá)，并且這種高表達(dá)與卵巢癌的組織學(xué)亞型有關(guān)，這說(shuō)明CCR9/CCL25可能與參與了卵巢癌的進(jìn)展。進(jìn)一步的體外細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)CCR9-CCL25相互作用在卵巢癌細(xì)胞的侵襲、遷移運(yùn)動(dòng)中發(fā)揮重要的促進(jìn)作用 ^[22-23]。

4.5 CCR9和乳腺癌研究

在乳腺癌中，CCR9在腫瘤組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織，并且低分化腫瘤組織中的CCR9表達(dá)最為明顯。CCR9/CCL25為乳腺腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)提供了優(yōu)勢(shì)環(huán)境，并通過(guò)PI3K/Akt依賴(lài)的方式使腫瘤對(duì)順鉑（Cisplatin）產(chǎn)生耐藥性。在體外實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)CCR9的表達(dá)與腫瘤的侵襲性有關(guān)：高侵襲性乳腺癌細(xì)胞株CCR9高表達(dá)，低侵襲性乳腺癌細(xì)胞株CCR9顯著減低。Transwell實(shí)驗(yàn)顯示，CCR9-CCL25促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的侵襲和遷移。因此，CCR9/CCL25生物軸在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮的作用與結(jié)腸癌及卵巢癌相似 ^[24-26]。

4.6 CCR9和胰腺癌研究

體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明趨化因子受體CCR9及其配體CCL25結(jié)合，明顯促進(jìn)腺上皮內(nèi)瘤和胰腺癌細(xì)胞增殖。CCR9在胰腺癌組織中表達(dá)，胰腺癌細(xì)胞可分泌CCL25，CCL25分泌的增加可激活CCR9的表達(dá)，從而促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的侵襲。CCR9和CCL25在胰腺癌引流淋巴結(jié)、胰腺癌組織和良性病變組織中的表達(dá)呈梯度分布，引流淋巴結(jié)中的表達(dá)量最高。胰腺癌中CCR9-CCL25與胰腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且與胰腺癌腫瘤細(xì)胞分化程度和TNM分期相關(guān)。研究者認(rèn)為CCR9可能成為胰腺癌綜合治療研究的新突破口 ^[27-28]。

4.7 CCR9和肺腺癌研究

肺腺癌中CCR9和ALDH1A1高表達(dá)，與遠(yuǎn)轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后密切相關(guān)。ALDH1A1高表達(dá)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是影響肺腺癌總生存期的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，CCR9和ALDH1A1在肺腺癌中的表達(dá)存在正相關(guān)，ALDH ^high細(xì)胞中CCR9的表達(dá)明顯增高，CCR9/CCL25信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路能明顯促進(jìn)肺腺癌腫瘤干細(xì)胞（Cancer stem cells，CSCs）的遷移和侵襲。通過(guò)該研究，揭示了肺腺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后的新機(jī)制，也為CCR9/CCL25用作肺腺癌治療研究的新靶標(biāo)提供了證據(jù) ^[29-30]。

4.8 CCR9和非小細(xì)胞肺癌研究

對(duì)非小細(xì)胞肺癌(NSCLC，non-small cell lung cancer)組織和癌旁組織CCR9的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)CCR9高表達(dá)于NSCLC組織中，在對(duì)NSCLC細(xì)胞系NCI-H157細(xì)胞的檢測(cè)中得到同樣的結(jié)果，而CCR9在正常人支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B上未檢測(cè)到表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)同樣證實(shí)，CCR9-CCL25對(duì)在NSCLC細(xì)胞侵襲和遷移能力上有重要作用。因此，目前的研究可以確定的是，CCR9/CCL25在NSCLC中高表達(dá)，與NSCLC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)，但是其作用分子仍未見(jiàn)報(bào)道，還需要進(jìn)一步研究 ^[31-34]。

4.9 CCR9和肝癌研究

采用免疫組化方法檢測(cè)出CCR9在肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）組織樣本中顯著升高，并與HCC患者的預(yù)后相關(guān)，CCR9表達(dá)與HCC患者的OS成反比，可作為HCC患者OS獨(dú)立的預(yù)后因素，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CCR9的高表達(dá)預(yù)后差的原因主要是由于CCR9表達(dá)通過(guò)下調(diào)細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子p21，p27和上調(diào)細(xì)胞周期蛋白D1，從而增強(qiáng)了HCC的增殖和致瘤性的原因所導(dǎo)致的，因此CCR9可作為HCC的新型預(yù)后標(biāo)志物。但目前CCR9/CCL25在肝癌領(lǐng)域的研究較少，仍需進(jìn)一步系統(tǒng)性的研究 ^[35]。

4.10 CCR9和黑色素瘤研究

CCR9在黑色素瘤小腸轉(zhuǎn)移灶、黑色素瘤細(xì)胞和由轉(zhuǎn)移灶分離建立的細(xì)胞株中均高表達(dá)，研究者認(rèn)為CCR9可能在黑色素瘤細(xì)胞小腸轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到關(guān)鍵的作用。此外，轉(zhuǎn)移到腸道的黑色素瘤可檢測(cè)到CCR9的表達(dá)，轉(zhuǎn)移到其他器官的細(xì)胞則不表達(dá)CCR9，這說(shuō)明高表達(dá)CCR9的黑色素瘤可特異性轉(zhuǎn)移至小腸。體外Transwell實(shí)驗(yàn)證實(shí)CCR9/CCL25生物軸的作用下，黑色素瘤細(xì)胞侵襲和遷移能力明顯增強(qiáng)，而當(dāng)CCR9/CCL25生物軸被anti-CCR9抗體或CCR9的RNA干擾技術(shù)破壞后，其促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞侵襲和遷移能力的作用被顯著削減 ^[36-40]。