隨著對(duì)細(xì)胞生理研究的逐漸深入，科學(xué)家們開始解析單個(gè)細(xì)胞的行為，這是因?yàn)榧词故峭瑯拥倪z傳物質(zhì)，同樣的周邊環(huán)境，這些細(xì)胞還是會(huì)朝著不同的方向發(fā)展，有時(shí)還會(huì)生成不同的功能，而且單個(gè)細(xì)胞的變化還關(guān)系到癌癥，神經(jīng)疾病等疾病。

然而要分析單個(gè)細(xì)胞，卻不是那么容易的事情，在基因表達(dá)分析中占據(jù)主要位置的DNA芯片這種分析方法，由于靈敏度不夠，所以不足以發(fā)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞水平上的差異，但是從單個(gè)細(xì)胞中挑選少量RNAs，或者蛋白也不容易做到，而且如果還要分析細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)因素，那就不只是繁瑣實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題，還需要物理學(xué)，機(jī)械學(xué)，和生物學(xué)的多方配合。

來(lái)自斯坦福大學(xué)的單分子研究專家Stephen Quake研究組在單分子實(shí)驗(yàn)中也遇到了相同的問(wèn)題，他們希望能檢測(cè)相同細(xì)胞對(duì)于相同信號(hào)的反應(yīng)，之前研究人員已經(jīng)利用定量PCR進(jìn)行了批量分析，但是他們還是希望能就單個(gè)細(xì)胞如何對(duì)不同濃度的信號(hào)分子TNF-α產(chǎn)生相應(yīng)的響應(yīng)進(jìn)行分析。

細(xì)胞信號(hào)交流調(diào)控著基本的細(xì)胞活性以及人體中相應(yīng)的細(xì)胞活動(dòng)。細(xì)胞準(zhǔn)確應(yīng)答周圍環(huán)境的能力是發(fā)育、組織修復(fù)和免疫的基礎(chǔ)。深入理解細(xì)胞間的相互交流將有助于了解生物系統(tǒng)的復(fù)雜性，或能開發(fā)出癌癥，糖尿病及其他自身免疫疾病的新療法。

因此Quake研究組探索出來(lái)一種新方法來(lái)觀察單一細(xì)胞在細(xì)胞信號(hào)復(fù)雜系統(tǒng)中的應(yīng)答反應(yīng)，這種方法就是高通量的微流體細(xì)胞培養(yǎng)(high- throughput microfluidic cell culture)，將這一技術(shù)與熒光顯微鏡，定量基因表達(dá)分析和建立數(shù)學(xué)模型等研究手段結(jié)合起來(lái)，Quake研究組首次發(fā)現(xiàn)相同細(xì)胞之間存在大范圍的差異，并且指出了科學(xué)家的一些認(rèn)識(shí)可能已經(jīng)被基于細(xì)胞群體研究的結(jié)果所誤導(dǎo)。

細(xì)胞活化這一結(jié)果是一樣的，然而細(xì)胞達(dá)到結(jié)果的過(guò)程可能是不一樣的，群體研究不能顯示信息錯(cuò)綜復(fù)雜的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)中的差異，而這在單一細(xì)胞水平中可以觀察到。

研究人員利用不同的蛋白濃縮物刺激細(xì)胞，這些濃縮物是免疫系統(tǒng)應(yīng)答炎癥或癌癥反應(yīng)的代表性物質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，一些細(xì)胞接受信號(hào)并被激活，而一些細(xì)胞則沒有激活。研究人員人員觀察到細(xì)胞以不同的方式產(chǎn)生應(yīng)答，但是細(xì)胞的基本反應(yīng)在許多方面是一致的。

這種方法的優(yōu)勢(shì)是效率十分高——利用這種方法，研究人員能同時(shí)處理成百上千的細(xì)胞，并且觀察長(zhǎng)達(dá)4天的時(shí)間里，這些細(xì)胞的反應(yīng)。而缺點(diǎn)就是微流體實(shí)驗(yàn)并不容易操作，因此一定要考慮清楚。如果你希望觀測(cè)細(xì)胞對(duì)于一個(gè)信號(hào)刺激的反應(yīng)，那么也許一個(gè)96孔板就能搞定，但是如果你希望了解細(xì)胞在系列環(huán)境中的反應(yīng)，那么微流體實(shí)驗(yàn)也許更加合適，具體來(lái)說(shuō)還得看個(gè)人的情況。

Quake研究組今年在單分子研究方面還獲得了另外一項(xiàng)重要的成果：他們發(fā)展了一種平價(jià)的單分子光譜技術(shù)，所謂單分子光譜，其實(shí)主要用來(lái)研究納米領(lǐng)域，其基本觀念非常簡(jiǎn)單：就是一次只觀測(cè)一個(gè)生物分子或納米粒子，因此可以輕易觀測(cè)到很多分子尺度的動(dòng)態(tài)過(guò)程，蛋白質(zhì)分子折迭(folding)即為一例。為了達(dá)到單分子光譜的靈敏度，關(guān)鍵之一就是要利用高數(shù)值孔徑(numerical aperture, NA)的物鏡來(lái)聚焦及收光，然而高NA的物鏡價(jià)格相對(duì)昂貴，而且還會(huì)衍生一些實(shí)驗(yàn)測(cè)量上的問(wèn)題。

為了解決這一問(wèn)題，以及無(wú)法做長(zhǎng)時(shí)間觀察，觀察視野較小及工作距離較短的問(wèn)題，研究人員將具有高折射率的二氧化鈦(TiO2)微米球放在單熒光分子及物鏡中間，讓TiO2微米球們扮演微透鏡(microlens)的角色，將熒光分子所發(fā)出的光聚焦至物鏡。這種結(jié)合微透鏡及平價(jià)低NA(=0.5)物鏡的作法，可偵測(cè)單分子訊號(hào)而不會(huì)有熱效應(yīng)的問(wèn)題，因此能做長(zhǎng)期觀測(cè)。他們利用這項(xiàng)技術(shù)成功地在70°C的高溫下，觀察到單一酶的活動(dòng)過(guò)程。