什么是宿主細(xì)胞蛋白（HCP）？
宿主細(xì)胞蛋白（HCP）是生物藥物生產(chǎn)過(guò)程中由宿主細(xì)胞（如酵母、大腸桿菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞等）殘留的蛋白質(zhì)雜質(zhì)。這類雜質(zhì)可能在細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵或表達(dá)目標(biāo)藥物蛋白時(shí)伴隨產(chǎn)生，盡管經(jīng)過(guò)純化工藝處理，仍可能殘留在最終產(chǎn)品中，從而影響藥物的安全性和有效性。
HCP檢測(cè)的重要性
HCP殘留造成的潛在風(fēng)險(xiǎn)主要包括：
- 引發(fā)患者免疫反應(yīng)（如發(fā)熱、過(guò)敏）
- 干擾藥物穩(wěn)定性與療效
- 導(dǎo)致監(jiān)管審批失?。‵DA、EMA、CFDA及ICH等均明確要求HCP閾值）
因此，對(duì)HCP殘留水平的準(zhǔn)確測(cè)量不僅是保障藥物臨床安全性的核心環(huán)節(jié)，更是優(yōu)化生產(chǎn)工藝、降低研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)、確保產(chǎn)品符合全球法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)的重要基石。
HCP檢測(cè)的常見(jiàn)方法
| 方法 | 技術(shù)特點(diǎn) | 適用場(chǎng)景 |
|---|---|---|
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定） |
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| 質(zhì)譜法（LC-MS/MS） |
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| Western Blot |
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| 二維凝膠電泳（2D-PAGE） |
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| 毛細(xì)管電泳（CE） |
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| HPLC |
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華美生物的HCP檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品介紹
作為行業(yè)“金標(biāo)準(zhǔn)”，ELISA法因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高和結(jié)果客觀可靠，被全球監(jiān)管機(jī)構(gòu)廣泛認(rèn)可。華美生物基于成熟的酶聯(lián)免疫技術(shù)平臺(tái)，開(kāi)發(fā)出一系列適用于多種宿主細(xì)胞的HCP檢測(cè)試劑盒，可精準(zhǔn)定量CHO、HEK293、大腸桿菌等表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)各環(huán)節(jié)（細(xì)胞培養(yǎng)上清、純化中間品、終產(chǎn)品）的HCP殘留，為生物藥工藝開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制提供可靠的分析工具。
ELISA法檢測(cè)HCP殘留的原理圖
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
高靈敏度檢測(cè)
采用效價(jià)≥106的高滴度抗體，結(jié)合親和純化工藝，檢測(cè)限低至ng/mL級(jí)別。
廣譜抗體覆蓋
采用高親和力多克隆抗體，可識(shí)別大部分宿主細(xì)胞蛋白，確保檢測(cè)全面性。
高穩(wěn)定性
采用廣譜蛋白穩(wěn)定劑和微孔板處理工藝，批內(nèi)/批間差小。
強(qiáng)大兼容性
優(yōu)化緩沖體系，有效降低復(fù)雜基質(zhì)干擾。
全流程解決方案
覆蓋生產(chǎn)全環(huán)節(jié)檢測(cè)，符合全球監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品列表
針對(duì)不同待測(cè)樣本類型，設(shè)置了不同的檢測(cè)試劑盒，請(qǐng)點(diǎn)擊產(chǎn)品詳情頁(yè)面根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的試劑盒。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 |
|---|---|
| CSB-EQ33261ECO | 大腸桿菌（E.coli）宿主蛋白殘留（HCP）殘留酶聯(lián)免疫試劑盒 |
| CSB-EQ33262CHO | 中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）宿主蛋白（HCP）殘留酶聯(lián)免疫試劑盒 |
| CSB-EQ33263CHO | 中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）宿主蛋白（HCP）殘留酶聯(lián)免疫試劑盒 |
| CSB-EQ33264HEK | 293細(xì)胞宿主蛋白殘留（HCP）殘留酶聯(lián)免疫試劑盒 |
| CSB-EQ33265PY | 畢赤酵母細(xì)胞宿主蛋白（HCP）殘留酶聯(lián)免疫試劑盒 |
常見(jiàn)問(wèn)題
Q1：本試劑盒適用于哪些樣本類型的檢測(cè)？
A：本試劑盒可定量檢測(cè)培養(yǎng)上清、蛋白純化過(guò)程樣品以及終產(chǎn)物中的宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留。適用于生物制藥研發(fā)、工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制等環(huán)節(jié)。
Q2：本試劑盒采用的是哪種檢測(cè)原理？
A：本試劑盒采用雙抗夾心法，通過(guò)包被抗體和HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成“抗體-抗原-抗體”復(fù)合物結(jié)構(gòu)，最終通過(guò)TMB顯色并測(cè)定OD值，實(shí)現(xiàn)對(duì)HCP殘留量的準(zhǔn)確定量。
Q3：試劑盒中各組分的保存條件是什么？開(kāi)封后能否繼續(xù)使用？
A：除封板膜外，所有試劑需在2-8℃密封冷藏保存。微孔板為可拆卸設(shè)計(jì)，未使用的板條用封板膜密封后可放回鋁箔袋中于4℃保存，所有試劑及組分開(kāi)封后一周內(nèi)用完。
Q4：為什么要做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)？如何操作？
A：加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)用于評(píng)估樣本基質(zhì)是否對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成干擾。例如針對(duì)產(chǎn)品CSB-EQ33260CHO-3，建議將稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品S1（400ng/mL）與待測(cè)樣本按1：3的比例混合（如25μL含/不含濃度為400ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品S1加入75μL待測(cè)溶液），計(jì)算回收率，理想的回收率應(yīng)在**80-120%**之間，以確保數(shù)據(jù)可靠性。
