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Your Good Partner in Biology Research

早期凋亡檢測的新工具

日期:2011-07-28 15:46:05

美國IMGENEX公司近日推出了一款全新的可逆凋亡探針pSIVA,用于磷脂酰絲氨酸(PS)外翻的檢測。

細胞膜的重排發(fā)生在凋亡的早期。在許多凋亡細胞中,這種重排導致磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜的內(nèi)側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。這一事件目前主要通過Annexin V來檢測。Annexin V是一種Ca 2+依賴的磷脂結合蛋白,在Ca 2+存在的情況下,與PS有很高的親和力,可與凋亡細胞膜上外翻的PS相結合。熒光(如GFP、FITC)標記的Annexin V一旦與凋亡細胞結合,就可以通過熒光顯微鏡觀察到。

IMGENEX開發(fā)的pSIVA(Annexin XII)也是一種基于Annexin的極性探針,可用于凋亡或其他形式細胞死亡的時空或激酶分析。pSIVA結合是可逆的,這樣研究人員就能夠檢測到瞬時的PS外翻,這與正常的生理過程以及可逆的凋亡事件相關聯(lián)。

pSIVA與一種靈敏的極性染料IANBD結合,只有當pSIVA與細胞膜結合時,才發(fā)出熒光。與不可逆的Annexin V結合相比,這種膜結合依賴的熒光以及可逆結合性質是技術上的一大進步,為凋亡通路和細胞存活帶來了更多信息。

pSIVA vs. Annexin V 

 

pSIVA-IANBD

Annexin V-FITC

無毒性

FACS

檢測早期凋亡

活細胞成像

 

活體成像

 

高通量篩選

 

無需洗滌

 

活力評估

 

pSIVA-IANBD熒光信號的短暫出現(xiàn)伴隨著瞬時的PS外翻。當PS回到細胞膜內(nèi)側,pSIVA-IANBD將被釋放到培養(yǎng)基中,熒光消失。至于瞬時的PS外翻,這被認為是正常的事件,不過仍有待進一步的研究。

pSIVA探針可應用于毒理學檢測、凋亡通路的高通量篩選、共聚焦顯微鏡、流式細胞儀以及凋亡的活體成像研究。

IMGENEX公司致力于開發(fā)和生產(chǎn)人體生理和疾病狀態(tài)的研究試劑、人類疾病的診斷試劑和治療試劑。這些新的試劑包括抗體、基因、蛋白表達系統(tǒng)、用于人類功能基因組研究的各種細胞和組織的陣列。涉及領域包括癌癥、凋亡、信號途徑、細胞衰老、代謝和感染等疾病。