近物所用新方法揭示電離輻射對線粒體DNA超螺旋構(gòu)象的影響
日期:2011-11-08 09:14:00
中科院近代物理研究所輻射生物醫(yī)學(xué)研究組的科研人員研究發(fā)現(xiàn),電離輻射能夠引起顯著的線粒體DNA超螺旋構(gòu)象變化,這對進(jìn)一步研究電離輻射對線粒體功能的影響具有指導(dǎo)意義。
線粒體DNA是人體細(xì)胞中唯一的核外遺傳物質(zhì),線粒體DNA構(gòu)象的變化可能通過影響線粒體功能而導(dǎo)致細(xì)胞命運(yùn)的改變。目前,傳統(tǒng)的DNA損傷檢測方法,如γH2AX,P53BP1 foci等,往往受到細(xì)胞DNA損傷修復(fù)系統(tǒng)相關(guān)因子的調(diào)控,從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,而且這些方法都無法檢測線粒體DNA損傷。
近物所研究人員首次使用長距離聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Long PCR)方法,對電離輻射引起的線粒體DNA損傷進(jìn)行了檢測。經(jīng)過驗(yàn)證,這種方法準(zhǔn)確反映了電離輻射引起的線粒體DNA損傷的劑量依賴性??蒲腥藛T還通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),對線粒體DNA超螺旋構(gòu)象的改變進(jìn)行了精確檢測。同時(shí),通過活性氧、線粒體數(shù)量等指標(biāo),確定了不同劑量電離輻射對線粒體功能的影響。
線粒體DNA超螺旋構(gòu)象的改變不僅反映了線粒體DNA環(huán)中的單/雙鏈斷裂情況,還暗示了線粒體DNA轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程的改變,對確定線粒體功能變化具有重要意義。