根據(jù)《Nature Medicine》上在線發(fā)表的一篇文章，德國神經(jīng)退行性疾病研究中心（DZNE）的研究人員采用一種新型方法，讓固定的小鼠脊髓變得透明，這樣他們就能看到3D的再生軸突軌跡，而無需進(jìn)行組織切片。

脊髓是傳遞來自皮膚、肌肉和關(guān)節(jié)到大腦與背的信息的重要通路。神經(jīng)軸突是貫穿大腦皮層和脊髓之間神經(jīng)元的細(xì)長突出，分布于大腦和脊髓之間，為一種關(guān)鍵類型的神經(jīng)纖維，參與皮質(zhì)脊髓的構(gòu)成和隨意運(yùn)動的實(shí)現(xiàn)。脊髓損傷后，沿皮質(zhì)脊髓的軸突嚴(yán)重受損，從而導(dǎo)致位于損傷部位的下運(yùn)動神經(jīng)元與大腦失去有效功能鏈接。

然而，中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的再生研究受限于現(xiàn)有的組織學(xué)和成像技術(shù)，因?yàn)樗鼈冎荒芴峁┹S突和膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)的部分信息。過去識別軸突再生的方法非常繁瑣，因?yàn)樗鼈冃枰_的組織切片。這些方法對3D的軸突路線研究也是不夠的，因?yàn)樗鼈冎荒芴峁?SPAN lang=EN-US>2D圖像。

Frank Bradke領(lǐng)導(dǎo)的研究小組利用四氫呋喃（THF）溶劑來分解組織中的脂類，并利用GFP來照亮軸突的路徑。為了使脊髓透明，樣品隨后浸泡在二氯甲烷以及苯甲醇苯甲酸芐酯中。

Bradke談到：“有時(shí)你認(rèn)為你看到了一個(gè)受傷的軸突，但它實(shí)際上是個(gè)幸免的軸突。這是一個(gè)大難題。臨床前的結(jié)果很難判斷，因?yàn)槟阒豢吹搅似??！?SPAN lang=EN-US>

利用這種新的四氫呋喃方法，借助高分辨率的雙光子顯微鏡，Bradke和他的同事獲得了小鼠脊髓中神經(jīng)細(xì)胞的3D圖像。之后他們利用超顯微鏡追蹤了標(biāo)記軸突的軌跡。

為了了解軸突受損后的再生，研究小組讓受損10天后的脊髓透明化，以便對再生的軸突進(jìn)行3D成像。通過四氫呋喃方法，他們發(fā)現(xiàn)了大量的再生軸突，數(shù)量比切片方法更多。此外，通過周圍軸突和中樞軸突中脊髓損傷的長期追蹤，研究人員區(qū)分了再生和幸免的軸突。

這種技術(shù)也讓研究人員能在脊髓受損后快速精確地對神經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)，特別是小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。盡管這種透明化的步驟采用親脂染料，但它不影響GFP小鼠中的熒光信號。

有了這種技術(shù)，Bradke希望能在小鼠模型上更準(zhǔn)確地檢測，以便在人類脊髓損傷時(shí)能夠讓軸突再生。此外，研究發(fā)現(xiàn)此過程也可應(yīng)用在其他器官上，包括淋巴結(jié)、脾臟、肺、乳腺和腫瘤組織。