現(xiàn)代基因組學(xué)的最大需求之一，就是得到人類和模式生物的高質(zhì)量完成基因組。目前，人們利用二代測(cè)序技術(shù)對(duì)越來越多的物種（從原核生物到真核生物）進(jìn)行了基因組測(cè)序，取得了許多重要的研究成果。

不過大部分物種的基因組還中存在有大量的缺口gap，就目前的數(shù)據(jù)來說，各種已測(cè)序物種的基因組中缺口gap所占的百分比從1.3%至13%不等。這是由于二代測(cè)序技術(shù)生成的片段短，而過短的測(cè)序片段無法跨越高度重復(fù)和高GC含量的基因組區(qū)域。大量的基因組空白區(qū)域中可能存在有重要的生物學(xué)功能信息，如果無法補(bǔ)齊這些缺口，不僅不能獲得完整的基因組物理結(jié)構(gòu)圖，還會(huì)給基因組信息的解讀造成不小的困難。目前人們主要使用步進(jìn)PCR結(jié)合Sanger測(cè)序或者illumina/454 Pair-end測(cè)序數(shù)據(jù)來填充空白區(qū)域，但是這些方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，成本高，填充效率低，無法從根本上解決問題。

美國(guó)Baylor醫(yī)學(xué)院的Richard Gibbs團(tuán)隊(duì)正在進(jìn)行一項(xiàng)重要研究，利用單分子測(cè)序技術(shù)對(duì)模式生物的基因組草圖進(jìn)行升級(jí)。他們借助的正是Pacbio RS單分子測(cè)序的獨(dú)特之處，這一技術(shù)無需PCR過程，能夠輕松完成高GC含量片段和高度重復(fù)區(qū)域片段測(cè)序。該研究團(tuán)隊(duì)的目標(biāo)是準(zhǔn)確、自動(dòng)化、快速且可重復(fù)的進(jìn)行基因組升級(jí)，他們還專門開發(fā)了高度自動(dòng)化的工具PBJelly，能夠?qū)?/SPAN>Pacbio測(cè)序得到的長(zhǎng)片段與基因組草圖進(jìn)行比對(duì)，填補(bǔ)或減少草圖中的缺口，從而完善基因組草圖。

Richard Gibbs的團(tuán)隊(duì)利用PacBio的長(zhǎng)讀長(zhǎng)，對(duì)兩個(gè)果蠅種（Drosophila pseudoobscura和Drosophila melanogaster，基因組缺口6.7M，占基因組大小5%）、虎皮鸚鵡（M. undulates，基因組缺口155M,占基因組大小11%）、黑子白眉猴（C.atys，基因組缺口198M，占基因組大小7%）的基因組進(jìn)行了升級(jí)。他們首先利用PacBio單分子測(cè)序技術(shù)進(jìn)行覆蓋（深度從4.4×到24×不等），然后使用PBJelly流程進(jìn)行分析。研究顯示長(zhǎng)讀長(zhǎng)數(shù)據(jù)可以大大降低基因組中的缺口數(shù)，其中D. melanogaster的基因組缺口數(shù)減少了15倍，虎皮鸚鵡和白眉猴的基因組缺口數(shù)減少了1.3至2.8倍，且這些基因組的缺口大小也減少了3-6倍。隨后，研究人員對(duì)隨機(jī)選擇的96個(gè)缺口進(jìn)行了Sanger測(cè)序，驗(yàn)證了這一方法的可靠性。

在這一研究中，單分子測(cè)序技術(shù)幫助研究者們獲得了很好的結(jié)果，大大提高了基因組的完整性，也降低了后續(xù)實(shí)驗(yàn)和分析的難度，遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)方法。

研究人員對(duì)于含有大基因組的脊椎動(dòng)物（虎皮鸚鵡基因組大小1.2G、黑子白眉猴2.8G)只進(jìn)行了低深度的測(cè)序（4.4-6.8×）就能較好的改善其基因組完整性，說明PacBio測(cè)序技術(shù)在大型基因組組裝領(lǐng)域具有強(qiáng)大的功能和應(yīng)用潛力。

該項(xiàng)目還在繼續(xù)進(jìn)行中，研究人員將會(huì)不斷的改進(jìn)組裝方法，提高基因組缺口的填補(bǔ)效率。目前，他們正在用這一方法對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物的基因組進(jìn)行升級(jí)。