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新型移動(dòng)HIV-DNA檢測(cè)技術(shù)

日期:2014-06-10 08:58:12

 

最近,在國際知名雜志《Analytical Chemistry》發(fā)表的一項(xiàng)研究中,美國萊斯大學(xué)的生物工程師們研發(fā)出一種簡(jiǎn)單、高度精確的檢測(cè)技術(shù),來檢測(cè)患者體內(nèi)的HIV跡象及病情發(fā)展情況。

 

萊斯大學(xué)生物工程師、全球衛(wèi)生技術(shù)學(xué)院的主任Rebecca Richards-Kortum稱,當(dāng)前診斷嬰兒HIV和監(jiān)測(cè)病毒載量的金標(biāo)準(zhǔn),通常是依賴僅在診所可用的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和專業(yè)技術(shù)。這項(xiàng)研究,開發(fā)出以核酸為基礎(chǔ)的新型HIV檢測(cè)技術(shù),能夠在醫(yī)療保健單位進(jìn)行檢測(cè)。

 

本文共同第一作者是Richards-Kortum 實(shí)驗(yàn)室的研究生Zachary CrannellBrittany Rohrman,他們開展了這項(xiàng)概念驗(yàn)證性工作,在今年早些時(shí)候,他們利用類似的技術(shù)檢測(cè)到引起腹瀉病隱孢子蟲病的寄生蟲。

 

這項(xiàng)新型檢測(cè)技術(shù),用基于重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù)取代了基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的復(fù)雜實(shí)驗(yàn)室程序,RPA可以對(duì)血液中的遺傳標(biāo)記物進(jìn)行快速多重?cái)U(kuò)增,從而使病毒的遺傳標(biāo)記物很容易地檢測(cè)到。在一個(gè)被稱為qRPA的檢測(cè)中,利用可通過輕便機(jī)器進(jìn)行定量檢測(cè)的熒光探針,靶定和標(biāo)記HIV DNA中的一段特定序列。最后,通過熒光DNA的軟件分析,就可使得臨床醫(yī)生以極高的準(zhǔn)確性,來確定病毒是否存在于患者的血液內(nèi),或病毒的量是多少。

 

研究人員通過放大內(nèi)部陽性對(duì)照對(duì)測(cè)試進(jìn)行校準(zhǔn)。Rohrman稱:“利用跟HIV序列相同的引物擴(kuò)增,因此檢測(cè)試驗(yàn)可以正常進(jìn)行。”研究人員最初只是打算尋找嬰兒中的HIV,但是該技術(shù)還可以幫助他們追蹤老年患者機(jī)體中的病毒載量。Crannell稱:“臨床醫(yī)生能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)患者體內(nèi)的病毒載量,從而確?;颊呤欠駥?duì)治療發(fā)生反應(yīng),這非常的重要。”

 

研究人員稱,為了臨床可行性,一種HIV DNA檢測(cè)能夠定量的病毒載量,必須超過四個(gè)數(shù)量級(jí),從很高到很低。他們稱,這種新型試驗(yàn)很容易滿足這個(gè)目標(biāo)。

 

他們正在開發(fā)用于資源匱乏地區(qū)的工具,在這些地區(qū)高科技實(shí)驗(yàn)室設(shè)備無法使用。盡管研究人員使用熱循環(huán)儀來進(jìn)行檢測(cè),但他們正在研究一種技術(shù),使得整個(gè)操作步驟維持在室溫和體溫之間,從而確保實(shí)驗(yàn)的通用性和準(zhǔn)確性。