一、目的要求

了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。
　　學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。

二、基本原理 

麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。 

三、實(shí)驗(yàn)材料 

(一)  藥品  
葡萄搪、蔗糖、NaN0₃、K₂HP0₄、KCl、MgSO₄·7H₂O，F(xiàn)eS0₄、瓊脂。 
　　(二)  儀器  
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。  
　　(三)  玻璃器皿  
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。  
　　(四)  其他物品  
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 

(一)  麥芽汁培養(yǎng)基的配制 

1．培養(yǎng)基成分  
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。 

2．配制方法   

(1)  用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
　　(2)  取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化完全)。   
　　(3)  糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清，加水20 ml，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。   
　　(4)  用波美比重計(jì)檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6．4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。   
　　(5)  如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時，加入2％瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。   
　　(6)  分裝、加塞、包扎。   
　　(7)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 

(二)  馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制

1．培養(yǎng)基成分  
　　馬鈴薯　　　20g  
　　葡萄糖　　　2 g  
　　瓊脂　　　　1.5-2g  
　　水　　　　　100ml  
　　自然pH

　　2．配制方法
　　(1)  配制20％馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml。80℃浸泡lh，用紗布過濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20％馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
　　(2)  配制時，按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。   
　　(3)  分裝、加塞、包扎。   
　　(4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

 (三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制  

1．培養(yǎng)基成分   
　　黃豆芽　　　10g  
　　葡萄糖　　　5g  
　　瓊脂　　　　1.5-2g  
　　水　　　　　100ml  
　　自然pH 
 
　　2．配制方法
　　(1)  稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 ml水，小火煮沸30 min，用紗布過濾，補(bǔ)足失水，即制成10％豆芽汁。  
　　(2)  配制時，按每100 ml10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補(bǔ)足失水。   
　　(3)  分裝、加塞、包扎。   
　　(4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

(四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制

1．培養(yǎng)基成分  
　　蔗糖　　　　　　　3g  
　　NaN0₃　　　　　0.3g  
　　K2HP0₄  　　　　0.1g  
　　KCl 　　　　　　 0.05g  
　　MgSO₄·7H₂O    　0.05 g  
　　FeS0₄ 　　　　　0.001 g  
　　瓊脂　　　　　　1.5-2g  
　　蒸餾水　　　　　100ml  
　　自然pH    
 
　　2．配制方法
　　(1)  稱量及溶化  量取所需水量約2／3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO₃ 、K₂HP0₄ 、KCl、MgSO₄。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1％的FeS0₄溶液。  
　　(2)  定容  候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。  
　　(3)  加瓊脂  加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。  
　　(4)  分裝、加塞、包扎。  
　　(5)  高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容 

記錄你所配制培養(yǎng)基的名稱及成分。