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陽離子填料純化抗體檢測方法?

日期:2023-07-12 13:51:59

    陽離子填料是一種常用于蛋白質(zhì)純化過程中的材料,可以通過吸附和洗脫的方式來純化目標蛋白質(zhì)。下面是一種使用陽離子填料純化抗體的方法:
 
    樣品制備:首先,將含有抗體的樣品加入適當?shù)木彌_液中,以維持適宜的pH和離子強度。
 
    填料平衡:將陽離子填料溶懸液加入純化柱中,并使用緩沖液進行填充劑平衡,以確保填充劑與緩沖液之間的交互作用。
 
    樣品加載:將樣品溶液緩慢地加入填充劑平衡好的純化柱中,讓抗體與填料表面的正電荷相互作用,并發(fā)生吸附。
 
    洗脫:使用適當?shù)南疵摼彌_液,可以通過改變pH、離子強度或洗脫劑濃度等條件,去除非特異性吸附的雜質(zhì)蛋白質(zhì)。洗脫后,目標抗體會被徹底洗脫出來。
 
    重生成:為了再次使用填充劑,可以使用一系列的重生成步驟來去除吸附在填充劑表面的殘留雜質(zhì)和去離子緩沖液。
 
    最終純化:通過收集洗脫液中富集的抗體,可以得到高純度的抗體。
 
    該方法僅僅是一種常見的純化步驟之一,具體的純化方案還需要根據(jù)實驗需求和樣品特性進行優(yōu)化和調(diào)整。