單克隆抗體的制備過程及原理
日期：2023-07-24 17:20:40
單克隆抗體的制備過程主要包括以下步驟：免疫原制備、免疫動物免疫、細胞融合、篩選和克隆化、生產(chǎn)和純化。
免疫原制備：首先，根據(jù)需要制備用于免疫的免疫原。免疫原可以是純化的蛋白質(zhì)、多肽、細胞表面分子等，也可以是化學(xué)合成的人工抗原。
免疫動物免疫：將免疫原注射到合適的免疫動物中，如小鼠、大鼠、兔子等。在一定時間內(nèi)，多次給予免疫原刺激，以促使免疫動物產(chǎn)生特異性抗體。
細胞融合：從免疫動物中獲取免疫細胞，通常是脾臟或骨髓細胞。將免疫細胞與腫瘤細胞（如骨髓瘤細胞）進行體外融合，生成雜交瘤細胞。
篩選和克隆化：利用選擇性培養(yǎng)基和篩選方法，篩選出產(chǎn)生特異單克隆抗體的雜交瘤細胞。常用的篩選方法有ELISA、免疫組化、流式細胞術(shù)等。然后，將單個雜交瘤細胞分離克隆化，培養(yǎng)單克隆細胞株。
生產(chǎn)和純化：從單克隆細胞株中大量培養(yǎng)和生產(chǎn)抗體。通常，采用培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件優(yōu)化，使單克隆細胞高效產(chǎn)生單克隆抗體。隨后，通過離心、層析、凝膠電泳等技術(shù)，對產(chǎn)生的抗體進行純化，去除雜質(zhì)以獲得純凈的單克隆抗體。
單克隆抗體制備的原理基于免疫系統(tǒng)的特性。通過免疫原的免疫刺激，免疫動物的B淋巴細胞可以產(chǎn)生多種抗體。細胞融合后形成的雜交瘤細胞具有多倍體性和無限增殖能力，同時保留了產(chǎn)生抗體的能力。通過篩選和克隆化，可以選擇出產(chǎn)生特異單克隆抗體的雜交瘤細胞。最終，大量培養(yǎng)和純化單克隆細胞產(chǎn)生的抗體，獲得高純度的特異性單克隆抗體用于研究、診斷或治療等領(lǐng)域。
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