常見的抗體標(biāo)記方法有哪些?各有什么特點(diǎn)?
日期:2025-06-04 14:52:56
1、熒光標(biāo)記:
特點(diǎn):具有高靈敏度和直觀性,可通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等設(shè)備進(jìn)行檢測,還能實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記(使用不同顏色的熒光染料)。
常用染料:FITC(綠色)、Cy3/Cy5(紅色 / 遠(yuǎn)紅外)、Alexa Fluor 488/647 等。
應(yīng)用場景:適用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)以及熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)實(shí)驗(yàn)。
2、酶標(biāo)記:
特點(diǎn):通過酶催化底物顯色(如 DAB 顯色呈棕色),可進(jìn)行定性或半定量檢測,成本較低,但需要注意底物的穩(wěn)定性。
常用酶:辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)。
應(yīng)用場景:主要用于 ELISA、Western blot 和免疫組化(IHC)。

3、生物素標(biāo)記:
特點(diǎn):生物素與鏈霉親和素具有極高的親和力(Kd≈10?¹? M),可用于信號(hào)放大,例如在 ELISA 中構(gòu)建 “生物素 - 親和素” 體系。
應(yīng)用場景:適用于多重檢測、芯片技術(shù)以及磁珠分離等領(lǐng)域。
4、同位素標(biāo)記:
特點(diǎn):具有極高的靈敏度(可檢測到皮克級(jí)水平),但存在放射性安全問題,且需要專業(yè)設(shè)備(如 γ 計(jì)數(shù)器)。
常用同位素:¹²?I、³H。
應(yīng)用場景:主要用于放射免疫分析(RIA)和受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。
5、納米顆粒標(biāo)記:
特點(diǎn):金納米顆粒標(biāo)記的抗體可通過電子顯微鏡觀察(呈現(xiàn)電子致密顆粒),在免疫電鏡中較為常用;磁性納米顆粒則可用于細(xì)胞分選或磁靶向治療。