植物外泌體如何提???
日期:2023-07-12 15:00:09
植物外泌體的提取是一種用于分離和純化植物細胞分泌出的外泌體小囊泡的方法。以下是一般的植物外泌體提取步驟:
收集植物細胞培養(yǎng)上清液或植物組織液:從培養(yǎng)的細胞上清液或植物組織液(例如葉片汁液、根系汁液等)中收集外泌體前體物質(zhì)??梢酝ㄟ^離心或濾液等方法來獲得液體樣品。
初步離心:將獲得的液體樣品進行初步離心,以去除大顆粒物質(zhì)和細胞碎片。常規(guī)的離心條件為低速離心(大約300-2000 g)5-10分鐘。
超速離心:將初步離心后的上清液進行超速離心,以沉淀植物外泌體。通常選擇高速離心條件(約10000-20000 g)30分鐘以上,沉淀的外泌體會在離心管底部形成。
洗滌:將外泌體沉淀用適當?shù)木彌_液進行洗滌,以去除雜質(zhì)和污染物。常用的緩沖液為PBS(磷酸鹽緩沖液)或其他適合的洗滌液。
再次超速離心:將洗滌后的外泌體沉淀進行再次超速離心,以去除洗滌液并收集純化的外泌體。超速離心條件和時間根據(jù)不同實驗需求可能會有所變化。
分析和應用:最終獲得的植物外泌體可以用于后續(xù)的分析和應用,例如形態(tài)學觀察、蛋白質(zhì)組學研究、RNA或DNA分析等。
植物外泌體的提取方法因樣品來源、研究目的和實驗要求的不同而有所差異。上述步驟僅為一般指南,具體的提取步驟應根據(jù)您的實驗要求來進行優(yōu)化和調(diào)整。
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