哺乳動物表達載體的元件和功能
日期:2023-07-27 14:11:13
哺乳動物表達載體通常包括以下元件和功能:
啟動子(Promoter):啟動子是位于基因組中的一段DNA序列,能夠在轉(zhuǎn)錄過程中吸引轉(zhuǎn)錄復(fù)合物結(jié)合并啟動基因的轉(zhuǎn)錄。在表達載體中,啟動子用于驅(qū)動目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄,從而使其在轉(zhuǎn)染到細(xì)胞后得以表達。
編碼序列(Coding Sequence):編碼序列是包含目標(biāo)基因的DNA序列,它在轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中被轉(zhuǎn)錄為RNA,并最終翻譯為蛋白質(zhì)。表達載體中,目標(biāo)基因的編碼序列被插入到載體的適當(dāng)位置,以便在細(xì)胞內(nèi)進行表達。

5'非翻譯區(qū)(5’ Untranslated Region,5’ UTR):5'非翻譯區(qū)位于編碼序列的起始端之前,它在轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中參與調(diào)控基因表達和轉(zhuǎn)錄的起始。在表達載體中,5'非翻譯區(qū)可以影響目標(biāo)基因的表達水平和穩(wěn)定性。
終止序列(Termination Sequence):終止序列位于編碼序列的末端,用于指示轉(zhuǎn)錄終止的信號。在表達載體中,終止序列幫助確保目標(biāo)基因在轉(zhuǎn)錄過程中被正確終止,以避免產(chǎn)生不完整的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。
選擇標(biāo)記(Selection Marker):選擇標(biāo)記是一種基因或基因片段,其表達產(chǎn)物能夠使經(jīng)過轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在特定培養(yǎng)條件下存活或表達。常用的選擇標(biāo)記包括抗生素耐藥基因和熒光蛋白基因等,在轉(zhuǎn)染后通過添加相應(yīng)的選擇劑來篩選和鑒定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。
表達調(diào)控元件(Expression Regulatory Elements):表達調(diào)控元件是一些特定的DNA序列,可以調(diào)控目標(biāo)基因的表達水平。例如,增強子可增加基因的表達量,靶向序列可以使基因在特定類型細(xì)胞中得到表達,啟動子增強子可以調(diào)節(jié)基因的組織特異性表達等。
這些元件和功能的組合和調(diào)節(jié)可以實現(xiàn)對目標(biāo)基因在哺乳動物細(xì)胞中的高效表達和調(diào)控,幫助科研人員進行基因功能研究、蛋白質(zhì)生產(chǎn)等相關(guān)工作。
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