昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)的差別對(duì)比
日期:2023-08-28 14:40:04
昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)是兩種常用的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng),它們?cè)诨驹?、適用性和特點(diǎn)等方面存在一些差別。以下是昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)的主要差異:
一、基本原理
? 1、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng):昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)主要利用昆蟲(chóng)細(xì)胞(如昆蟲(chóng)細(xì)胞株Sf9、Sf21)或昆蟲(chóng)宿主(如昆蟲(chóng)家蠶、斑馬蛾)來(lái)表達(dá)外源蛋白。常用的載體是昆蟲(chóng)特有的病毒,如桿狀病毒(baculovirus),通過(guò)將目標(biāo)基因插入病毒基因組中實(shí)現(xiàn)表達(dá)。
? 2、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng):哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)則利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞(如CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞)作為宿主,通過(guò)基因轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)形成穩(wěn)定細(xì)胞株的方式,使宿主細(xì)胞自身合成目標(biāo)蛋白。
二、適用性
? 1、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng):昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)適用于表達(dá)較大、復(fù)雜的蛋白質(zhì),特別是膜蛋白和多亞基復(fù)合物等。它在研究、工業(yè)生產(chǎn)以及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
? 2、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng):哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)適用于表達(dá)高度復(fù)雜的蛋白質(zhì),如糖基化、折疊和后轉(zhuǎn)譯修飾等方面要求較高的蛋白質(zhì)。它通常被用于生物藥物的研發(fā)和生產(chǎn),以及對(duì)蛋白質(zhì)相互作用和結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系的研究。

三、蛋白質(zhì)折疊和修飾
1、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng):昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)通常會(huì)經(jīng)歷正確折疊和一些翻譯后修飾,如糖基化和拓?fù)涿感揎棥H欢?,與哺乳動(dòng)物細(xì)胞相比,昆蟲(chóng)細(xì)胞的蛋白質(zhì)修飾能力較弱,對(duì)某些復(fù)雜修飾(如人類(lèi)特異性糖基化)的模擬有限。
2、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng):哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有豐富的蛋白質(zhì)修飾機(jī)制,如多種糖基化、磷酸化、甲基化等。這使得哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)能夠更好地模擬人體的蛋白質(zhì)修飾過(guò)程,產(chǎn)生更加適宜用于臨床應(yīng)用的生物藥物。
四、表達(dá)穩(wěn)定性
1、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng):昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)通常通過(guò)病毒感染來(lái)實(shí)現(xiàn)外源蛋白的表達(dá),需要進(jìn)行病毒擴(kuò)增和感染控制,表達(dá)穩(wěn)定性較低。
2哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng):哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)在轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)形成穩(wěn)定細(xì)胞株后,具有較高的表達(dá)穩(wěn)定性和持續(xù)性。
昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)在基本原理、適用性、蛋白質(zhì)折疊和修飾以及表達(dá)穩(wěn)定性等方面存在一些差別。在選擇使用哪種表達(dá)系統(tǒng)時(shí),需要根據(jù)蛋白質(zhì)的特性、表達(dá)需求和應(yīng)用場(chǎng)景進(jìn)行綜合考量。