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大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)

日期:2023-08-28 15:51:00


    大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是最常用的原核表達(dá)系統(tǒng)之一,具有以下優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn):
 
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)
 
    高表達(dá)水平:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)高水平的目標(biāo)蛋白表達(dá)。大腸桿菌細(xì)胞具有強(qiáng)大的代謝能力和豐富的細(xì)胞機(jī)制,使其能夠高效地合成和折疊蛋白質(zhì)。
 
    便捷和經(jīng)濟(jì):相對(duì)于其他表達(dá)系統(tǒng),大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單、成本低廉。菌株培養(yǎng)和蛋白表達(dá)周期較短,適用于快速大規(guī)模生產(chǎn)。
 
    可調(diào)控性:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)可以通過選擇合適的啟動(dòng)子和誘導(dǎo)劑,調(diào)控目標(biāo)基因的表達(dá)水平。這使得研究人員能夠根據(jù)需要靈活地控制表達(dá)量和時(shí)間。
 
    易于遺傳工程:大腸桿菌的基因組信息豐富,具有先進(jìn)的遺傳工程技術(shù)。通過遺傳操作,可以構(gòu)建改造菌株,增強(qiáng)表達(dá)性能、改善折疊能力等,提高目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平和純度。
 
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大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的缺點(diǎn):
 
    蛋白質(zhì)折疊問題:大腸桿菌是一種原核細(xì)胞,其細(xì)胞內(nèi)環(huán)境與真核細(xì)胞存在差異。某些復(fù)雜蛋白質(zhì)(如糖基化蛋白)或需復(fù)雜結(jié)構(gòu)形成的蛋白質(zhì)在大腸桿菌中可能無(wú)法正確折疊,導(dǎo)致表達(dá)產(chǎn)物不具功能性。
 
    內(nèi)毒素產(chǎn)生:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中,細(xì)胞壁內(nèi)毒素(endotoxin)的產(chǎn)生是一個(gè)潛在問題。當(dāng)大量目標(biāo)蛋白表達(dá)時(shí),內(nèi)毒素的積累可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性,并對(duì)目標(biāo)蛋白的純化和功能造成困擾。
 
    限制于溶解態(tài)蛋白質(zhì):大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)主要適用于溶解態(tài)蛋白質(zhì)表達(dá),對(duì)于聚集態(tài)或難溶性蛋白質(zhì)的表達(dá)可能存在困難。
 
    有限的翻譯后修飾:大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)無(wú)法進(jìn)行某些特定的翻譯后修飾,如糖基化、磷酸化等。這對(duì)于某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能可能具有重要影響。
 
    在選擇表達(dá)系統(tǒng)時(shí),需要根據(jù)特定的目標(biāo)蛋白質(zhì)性質(zhì)、表達(dá)需求和項(xiàng)目限制等因素進(jìn)行綜合權(quán)衡。