搡老女人多毛老妇女中国,日韩亚洲欧美中文高清在线,人妻少妇一区二区三区,色妞色综合久久夜夜,日本熟妇xxxx

Your Good Partner in Biology Research

酵母雙雜交細胞生長過程

日期:2023-10-09 16:38:37


    酵母雙雜交是蛋白質(zhì)相互作用研究方法。下面是酵母雙雜交細胞生長過程的簡要描述:
 
?    制備酵母雙雜交菌株:首先,需要選取適合的酵母菌株,常用的有Saccharomyces cerevisiae。然后,構(gòu)建報告基因的表達載體,包括激活子(AD)和靶標基因的融合蛋白質(zhì);以及DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DBD)和蛋白交互伴侶的融合蛋白質(zhì)。將這些載體導(dǎo)入酵母菌株中,得到酵母雙雜交菌株。
 
?    酵母雙雜交實驗:將酵母雙雜交菌株分別在選擇性培養(yǎng)基和非選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。選擇性培養(yǎng)基含有特定的缺失營養(yǎng)物質(zhì),只有具有蛋白相互作用的酵母菌株才能存活并形成菌落。
 
\
 
?    菌落觀察與篩選:經(jīng)過一段時間的培養(yǎng),可以觀察到菌落的形成情況。如果兩個融合蛋白質(zhì)之間存在相互作用,則菌落可以在選擇性培養(yǎng)基上生長并形成。通過觀察和篩選,可以找到可能存在蛋白相互作用的菌落。
 
?    驗證相互作用:對于篩選出的菌落,需要進行進一步的驗證來確認蛋白相互作用的可靠性。常用的方法包括β-galactosidase酶活性分析、熒光素酶報告基因表達分析等。
 
?    整個酵母雙雜交實驗過程主要包括菌株制備、酵母雙雜交實驗、菌落觀察與篩選以及相互作用驗證等步驟。這個過程的長度取決于實驗設(shè)計的復(fù)雜性和所需觀察的時間點,通常需要幾天至幾周的時間完成。