蛋白純化的最高純度能達(dá)到多少,怎么驗(yàn)證?
日期:2025-05-16 14:03:29
純度標(biāo)準(zhǔn):
常規(guī)純化:≥95%(SDS-PAGE 考馬斯亮藍(lán)染色)。
高純度需求:≥98%(HPLC-SEC 檢測(cè),雜質(zhì)峰面積<2%)。
技術(shù)組合:
親和層析(His/Strep 標(biāo)簽):一步純化至 80-90% 純度。
離子交換層析(IEX):去除電荷差異雜質(zhì)(如核酸、內(nèi)毒素)。
凝膠過濾層析(SEC):分離聚集體,同時(shí)分析分子量(如抗體單體純度>99%)。
驗(yàn)證手段:LC-MS/MS 鑒定肽段覆蓋率,內(nèi)毒素檢測(cè)(LAL 法,<0.1 EU/μg)。