無標簽蛋白純化的技術(shù)挑戰(zhàn)與解決方案？
日期：2025-05-16 14:05:12
挑戰(zhàn)：缺乏特異性結(jié)合標簽，依賴蛋白天然特性（如電荷、疏水基團、配體結(jié)合能力）。
解決方案：
免疫親和層析：利用特異性抗體（如 Anti-Flag 抗體偶聯(lián)磁珠），適用于已知表位的蛋白。
金屬螯合層析：利用蛋白表面天然組氨酸簇（如天然 His-rich 區(qū)域），需預(yù)實驗驗證結(jié)合力。
共價層析：通過巰基 - 二硫鍵交換捕獲含半胱氨酸的蛋白（如硫氧還蛋白）。
關(guān)鍵：標簽切除酶（如 TEV 蛋白酶）需通過 SEC 去除，殘留量＜0.05%。
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