Nature新技術(shù)突破:細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的新奧秘
日期:2014-12-05 09:12:52
來(lái)自加拿大蒙特利爾大學(xué)醫(yī)院研究中心(CRCHUM)的Daniel Kaufmann博士研究組研發(fā)出了一種新技術(shù),能更詳細(xì)的解釋細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)錄的奧秘,“這個(gè)新研究工具為我們提供了一種更為全面的視角,深入探討在多種疾病,如HIV病毒感染中的免疫應(yīng)答過(guò)程。在基因轉(zhuǎn)錄水平上,目前的研究技術(shù)(如顯微技術(shù))存在操作復(fù)雜困難,費(fèi)用較高等問(wèn)題,”Kaufmann博士解釋道。
這項(xiàng)技術(shù)被稱(chēng)為“FISH investigation protocol”(FISH-熒光原位雜交技術(shù)),熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法,即使用熒光素標(biāo)記探針,檢測(cè)探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。
這項(xiàng)技術(shù)在這一方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了目前的流式細(xì)胞儀檢測(cè)流程,獲得了轉(zhuǎn)錄RNA更為清晰的圖像,這對(duì)于細(xì)胞信息的傳遞來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。研究人員將這一成果公布在Nature Communications雜志上。
流式細(xì)胞儀本身就能在細(xì)胞快速通過(guò)檢測(cè)口的時(shí)候同時(shí)檢測(cè)數(shù)以萬(wàn)計(jì)的細(xì)胞,這項(xiàng)技術(shù)起源自1934 年,當(dāng)時(shí)流失細(xì)胞技術(shù)主要用于計(jì)算組成器官和血液中的細(xì)胞數(shù)量,經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,這一工具成為了分析細(xì)胞各種物理特性的一種重要方法,今天流式細(xì)胞儀也成為了免疫學(xué)和癌癥研究實(shí)驗(yàn)室中必備的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。
然而,這種工具也存在一些問(wèn)題,其中主要障礙就是它只能用于研究那些有特異性抗體識(shí)別標(biāo)記分子的蛋白。不幸的是,許多蛋白并沒(méi)有特異性抗體,所以流式細(xì)胞技術(shù)一直無(wú)法被推廣。此外,對(duì)于癌癥、艾滋病等一些由于細(xì)胞前蛋白問(wèn)題造成的疾?。?/span>DNA信息傳遞給RNA攜帶者的轉(zhuǎn)錄過(guò)程的去調(diào)控),經(jīng)典流式細(xì)胞技術(shù)無(wú)法檢測(cè)這一過(guò)程中到底發(fā)生了什么。
Kaufmann博士研究組與Affymetrix 公司合作,突破了這一技術(shù)障礙,他們采用研發(fā)的新技術(shù)分析細(xì)胞內(nèi)遺傳信息傳遞中的一個(gè)基礎(chǔ)步驟。這種技術(shù)目前已經(jīng)申請(qǐng)了專(zhuān)利,能通過(guò)一個(gè)為期兩天的操作手冊(cè),通過(guò)復(fù)雜的試劑配比,完成任務(wù)。
研究人員指出,這一新方法利用一臺(tái)標(biāo)準(zhǔn)的流式細(xì)胞儀,一個(gè)雜交爐,和各種精確配比的試劑(作為熒光顯微探針),就能獲得之前無(wú)法解析的細(xì)胞信息傳遞過(guò)程。
這一技術(shù)的應(yīng)用將隨著其對(duì)于疾病致病機(jī)制,以及藥物作用方式的解析,對(duì)分子生物學(xué)研究產(chǎn)生巨大的影響。
“從原理上說(shuō),我們的技術(shù)可以被應(yīng)用于任何物種,可以檢測(cè)人體和動(dòng)物產(chǎn)生的各種RNA 分子,”Kaufmann博士說(shuō)。